細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)光散射研究.pdf

1、動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)是光散射技術(shù)的一個(gè)非常重要的分支，它通過測(cè)定由溶液中微粒的熱布朗運(yùn)動(dòng)而引起散射光的微小頻移及其角度依賴性可以確定溶液中分子或粒子的擴(kuò)散系數(shù)、流體力學(xué)半徑等動(dòng)態(tài)力學(xué)參數(shù)，且通過計(jì)算機(jī)處理，還可以計(jì)算出體系的粒徑分布的信息。該技術(shù)具有成本低、測(cè)量速度快、精度高、對(duì)樣品無損壞等優(yōu)點(diǎn)，在眾多科研領(lǐng)域中得以廣泛的應(yīng)用。在生物醫(yī)學(xué)上，由于癌癥是生命的大敵，一直都是人們研究的熱點(diǎn)。但是至今采用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)對(duì)細(xì)胞內(nèi)大分子的研究還甚少，因

2、此本文開展了細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)光散射研究。
　　 本文首先用標(biāo)準(zhǔn)聚苯乙烯乳膠球溶液對(duì)實(shí)驗(yàn)中所用的廣角激光光散射儀BI-200SM進(jìn)行了標(biāo)定，以確保后面實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
　　 由于不同濃度的溶液會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果有一定的影響，因此在做細(xì)胞內(nèi)蛋白的動(dòng)態(tài)光散射測(cè)量之前，對(duì)不同濃度的牛血清白蛋白溶液進(jìn)行了測(cè)量。結(jié)果顯示，在一定濃度范圍內(nèi)，光強(qiáng)自相關(guān)函數(shù)曲線的穩(wěn)定性隨濃度增加而增加，而相關(guān)曲線的弛豫時(shí)間隨著溶液濃度的增加而減小，粒徑測(cè)量的

3、相對(duì)誤差也隨著濃度的增加而逐漸減小。
　　 應(yīng)用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)研究肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞內(nèi)蛋白的光散射特性的區(qū)別，首先培養(yǎng)了足夠的正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞，然后分別提取其總蛋白，用廣角激光光散射儀對(duì)兩種細(xì)胞內(nèi)提出的蛋白溶液進(jìn)行測(cè)量，從所得到光強(qiáng)、粒徑和粒徑分布等數(shù)據(jù)分析正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞內(nèi)蛋白濃度相同時(shí)不同的光散射特性。結(jié)果顯示，在同等濃度下，肝癌細(xì)胞內(nèi)蛋白散射能力更強(qiáng)，平均粒徑更大，分散程度不如正常肝細(xì)胞內(nèi)蛋白好。兩種細(xì)胞內(nèi)蛋白溶液的