中國狼蛛科（Lycosidae）常見屬種16S rRNA序列及其分子系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf

1、　　本文首次采用DNA測序方法對我國狼蛛科常見的4亞科6屬26種和漏斗蛛科中的緣漏斗蛛的線粒體16SrRNA部分序列進行了測定；并以北美豹蛛屬中兩個種和實驗中測定的緣漏斗蛛的16SrRNA部分序列做為外類群；用Mega軟件的UPGMA法和Phylip軟件中NJ、MP、ML法構建分子系統(tǒng)樹。獲得如下實驗結果：1.采用自行設計的引物1：(5’-AGCCGCTTTTGTGCTAAGGTA-3’)和引物2：(5’-TAGAAGATAGAAACC

2、GACCTG-3’)進行PCR擴增和測序，電泳后得到400-450bp之間的條帶。2.獲得狼蛛科26個種和漏斗蛛科1個種的16SrRNA實驗樣品，測序后16SrRNA基因部分序列長度為：340bp到360bp，其平均堿基組成為：T：36.1﹪；C：12.2﹪；A：39.0﹪；G：12.8﹪；與北美豹蛛屬的堿基含量相類似，T、A的含量高于C、G含量。3.對狼蛛科和漏斗蛛科27個種的16SrRNA序列進行比對后，共檢出133個堿基存在變異，

3、其中有90個簡約信息位點。說明16SrRNA序列是保守序列，適用于物種的系統(tǒng)發(fā)育研究。4.應用Mega軟件、Phylip軟件以自測的26種狼蛛、1種漏斗蛛和他測的2種北美豹蛛的16SrRNA序列為材料，共構建出四種方法的分子系統(tǒng)樹。由于所依據的計算原理不同，因而使所構建的樹的拓撲結構有所不同。最后采用Phylip軟件中CONSENSE程序，估算一致性，得出最優(yōu)分子系統(tǒng)樹。　　綜上所述，本文應用分子生物學技術所測定的狼蛛科6屬屬內和屬間

4、的親緣關系，總體上與現有的形態(tài)分類系統(tǒng)大致相同，驗證了傳統(tǒng)分類系統(tǒng)方向上的正確性。但是下列結果與傳統(tǒng)形態(tài)分類系統(tǒng)有明顯的分歧：1)在傳統(tǒng)形態(tài)分類系統(tǒng)中，水狼蛛屬和馬蛛屬因兩者親緣關系近，而同歸屬一個亞科，但根據上述構建的分子系統(tǒng)樹，水狼蛛屬和馬蛛屬應該是由兩個不同分支進化而來，因為分子系統(tǒng)樹上顯示兩者并未聚成一個并系群；且水狼蛛屬比馬蛛屬較早從原始祖先中分化出來，地位較為原始。2)片熊蛛從熊蛛屬中分離出來，與熊蛛屬和獾蛛屬組成了一個并系