南方紅豆杉有效成分研究.pdf

1、南方紅豆杉（Taxus chinensis var. mairei）又稱美麗紅豆杉，系裸子植物亞門（Cymnospermai）松杉綱（Coniferopsode）紅豆杉目（Taxales）紅豆杉科（Taxaceae S. F. Gery）紅豆杉屬（Taxus Linn）植物，特產(chǎn)于我國(guó)，主要分布于長(zhǎng)江流域、南嶺山脈山區(qū)以及河南、陜西（秦嶺）、甘肅等省的山地或溪谷，是紅豆杉屬中生長(zhǎng)最快、分布最廣的植物。紅豆杉屬植物在我國(guó)民間一般稱為紫杉，

2、其枝葉具有通經(jīng)止痛、利尿、降血糖等作用。
　　南方紅豆杉（Taxus chinensis var. mairei）主要化學(xué)成分為二萜類化合物、甾體類化合物、木脂素以及黃酮類化合物等，其中最重要的化學(xué)成分是其二萜類化合物紫杉醇（taxol）?？鼓[瘤藥物紫杉醇最初從紅豆杉屬植物短葉紅豆杉（Taxus brevifolia Nutt）樹皮中分離得到，由于其顯著的抗癌活性和獨(dú)特的抗癌作用機(jī)制，紫杉醇及紅豆杉屬植物引起了全世界廣泛關(guān)注[2]

3、。但紫杉醇在紅豆杉屬植物中的含量極低，而且天然紅豆杉屬植物資源極其匱乏，紫杉醇及其他紫杉烷類化合物結(jié)構(gòu)復(fù)雜，化學(xué)合成困難，這樣就極大地限制了紫杉醇的開發(fā)和利用。因此，為了緩解紫杉醇來(lái)源問題，減少對(duì)野生紅豆杉屬植物資源的破壞，并進(jìn)一步尋找具有抗癌活性的化學(xué)成分尤其是紫杉烷類化合物，我們對(duì)南方紅豆杉的可再生部分即枝葉的化學(xué)成分進(jìn)行研究，對(duì)所獲得的紫杉烷類化合物單體進(jìn)行了體外抗腫瘤活性作用篩選，并且對(duì)10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ（10-DABⅢ）的

4、分離純化工藝進(jìn)行了考察。
　　以南方紅豆杉（Taxus chinensis var. mairei）的可再生枝葉為研究對(duì)象，利用現(xiàn)代分離手段和技術(shù)對(duì)其化學(xué)成分，尤其是紫杉烷類化學(xué)成分進(jìn)行研究，并利用現(xiàn)代波譜技術(shù)，包括：1H-NMR,13C-NMR, MS等對(duì)分離的到的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，從南方紅豆杉的枝葉中分離得到30個(gè)單體化合物，并鑒定了其中23個(gè)化合物，包括18個(gè)紫杉烷類化合物，5個(gè)非紫杉烷類化合物。鑒定結(jié)果如下：Ceph

5、alomannine（三尖杉寧堿）（1）、Taxol（紫杉醇）（2）、9α,10β,13α-triacetoxy-5α-cinnamoyoxytaxa-4(20),11-diene（3）、Taxuspine B（4）、Taxin B（5）、13-cinnamoylbaccatinⅢ（6）、Taxcuspine X（7）、Taxachitriene A（8）、2α,7β,13α-triacetoxy-5α,10β-dihydroxy-9-

6、keto-2(3→20)abeo-taxane（9）、2-deacetoxyltaxinine J（10）、7β,9α,10β,13α,20-pentaacetoxy-2α-benzoyloxy-4α,5α-dihydroxytax-11-ene（11）、2-deacetoxydecinnamoyl taxinine J（12）、BaccatinⅥ（13）、N-methyltaxol C（14）、20-deacetyltaxachitr

7、iene A（15）、7-epi-10-deacetyl taxol（16）、Taxinine M（17）、Taxacin（18）、Apigenin（芹菜素）（19）、β-谷甾醇（20）、對(duì)羥基苯甲醛（21）、Palmitic acid（棕櫚酸）（22）、7R,11R-phytol（23）。其中，化合物23首次從本屬植物中分離得到，化合物4、12、14、16、19、22為首次從南方紅豆杉中分離得到。
　　從紅豆杉植物所得紫杉烷類化

8、合物中，10-去乙?；涂ㄍあ螅?0-DABⅢ）是半合成抗癌藥物紫杉醇（taxol）和多西紫杉醇（docetaxel）的前體原料。為了研究對(duì)10-DABⅢ的分離純化工藝，本試驗(yàn)通過考察LX-17、LX-28、LX-38、LX-60、LSA-21、LSA-10、D101、HPD-100、HPD-450、HPD-600、DM-130、ADS-7、ADS-8、AB-8、DM-2、HP20、MW-1、MW-2共十八種大孔樹脂對(duì)紅豆杉枝葉60%甲

9、醇提取物中10-DABⅢ的吸附和解吸附能力，篩選出 MW-1為最佳試驗(yàn)樹脂，并研究了其對(duì)10-DABⅢ的吸附和解吸附性能，確定了最佳的吸附和解吸附工藝參數(shù)。結(jié)合重結(jié)晶和DAC分離純化過程，從紅豆杉提取物（10-DABⅢ含量0.30%）中得到10-DABⅢ產(chǎn)物（純度98.3%，回收率為64.35%）。
　　通過MTT比色法對(duì)從南方紅豆杉中分離得到的紫杉烷類化合物進(jìn)行體外抗腫瘤活性作用篩選。以紫杉醇為陽(yáng)性對(duì)照，觀察所得紫杉烷類化合物對(duì)