CDK1在HepG2細(xì)胞的表達(dá)及活性對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察Cdk1蛋白表達(dá)及其活性對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法:克隆Cdk1基因質(zhì)粒和Cdk1siRNA,并將其轉(zhuǎn)染到肝癌HepG2細(xì)胞中。另外應(yīng)用roscovintine(Cdks的抑制劑)刺激細(xì)胞，然后給予紫外線（UV）照射。用WesternBlot檢測(cè)轉(zhuǎn)染的Cdk1蛋白的表達(dá)，用核素標(biāo)記測(cè)定其活性；用HO33342(Hoechst33342)的免疫熒光染色細(xì)胞核判斷細(xì)胞凋亡的情況。分析Cdk1蛋白表達(dá)及活性對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡

2、的影響。
　　結(jié)果：Cdk1可以在HepG2良好地表達(dá)；Cdk1siRNA可以有效地沉默Cdk1的表達(dá)；Roscovintine可抑制Cdk1的活性；細(xì)胞凋亡率在Roscovintine刺激細(xì)胞時(shí)的最高vsCdk1轉(zhuǎn)染細(xì)胞組和Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞組（P<0.01），在Cdk1轉(zhuǎn)染細(xì)胞高于Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞組（P<0.01）和EV轉(zhuǎn)染細(xì)胞組（P<0.05），在Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞最低。結(jié)論：過(guò)度表達(dá)Cdk1可以增