Clodronate脂質(zhì)體對急性壞死性胰腺炎大鼠Kupffer細(xì)胞凋亡的作用.pdf

1、目的:急性壞死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)病情兇險,病程發(fā)展快,病死率高,其病程中常出現(xiàn)全身性炎癥反應(yīng)綜合征、嚴(yán)重感染、感染性休克及多器官功能障礙綜合征(multipieorgan dysfunction syndrome,MODS),導(dǎo)致死亡。近年來隨著對其發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞在ANP中起重要的作用。本研究旨在探討氯膦酸二鈉脂質(zhì)體(liposomal clodrona

2、te,LC)對ANP大鼠枯否細(xì)胞(Kupffer cell,KC)凋亡的作用。
　　 方法:采用薄膜法制備LC；經(jīng)大鼠胰腺被膜下均勻注射5％牛磺膽酸鈉4ml/kg制作ANP模型,分離培養(yǎng)ANP大鼠Kupffer細(xì)胞,加入不同體積的Clodronate旨質(zhì)體(50μl、100μl、150μl)進(jìn)行干預(yù),然后分別采用MTT法,流式細(xì)胞術(shù)和DNA瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測KC增殖、凋亡情況。
　　 結(jié)果:所制備的脂質(zhì)體直徑100-

3、200nm,Clodronate包裹率為(5.8％),透射電鏡檢查見其大小均勻。獲得的KC形態(tài)正常,經(jīng)瑞氏染色法鑒定純度>90％,臺盼藍(lán)染色,細(xì)胞存活率>95％。在三種不同體積的LC干預(yù)24小時后,KC的抑制率分別為17.4％,24.2％和31.1％:流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),在三種不同體積LC干預(yù)下,KC凋亡率分別為(14.12±0.37)％,(18.74±0.43)％和(27.51±0.39)％,差異均有顯著性(P<0.01)；經(jīng)1.2％