不同光照條件下褪黑素對鴨免疫機(jī)能的影響.pdf

1、本試驗(yàn)分3組(短光照組6h、對照組12h和長光照組18h)飼養(yǎng)幼鴨45只，通過控制光照時間來改變鴨體內(nèi)褪黑素的水平，利用經(jīng)典血細(xì)胞計(jì)數(shù)法、流式細(xì)胞術(shù)、放射免疫測定法、酶聯(lián)免疫分析法、分子克隆和原位雜交技術(shù)對外周血細(xì)胞、細(xì)胞因子、免疫球蛋白、淋巴細(xì)胞及其亞群的變化和褪黑素3型受體亞型在鴨免疫器官中mRNA的表達(dá)及分布規(guī)律進(jìn)行了研究，從而闡明不同光照條件下內(nèi)源性褪黑素對鴨免疫功能的影響。結(jié)果如下： 隨著光照時間的縮短，內(nèi)源性褪黑素水

2、平的升高，鴨外周血中的白細(xì)胞數(shù)(P<0.01)、紅細(xì)胞數(shù)(P<0.01)、血紅蛋白含量(P<0.01)、IL-2(P<0.05)、IL-6(P>0.05)、TNF-α(P>0.05)、γ-IFN(P<0.01)、IgG(P<0.01)、CD3<'+>CD4<'+>(P<0.01)、CD3<'+>CD8<'+>(P<0.01)T細(xì)胞和Bu-1a<'+>B細(xì)胞(P<0.01)的數(shù)量均增加；隨著光照時間的延長，內(nèi)源性褪黑素水平的降低，鴨外周血

3、中的白細(xì)胞數(shù)(P<0.01)、紅細(xì)胞數(shù)(P<0.01)、血紅蛋白含量(P<0.05)、IL-2(P<0.05)、IL-6(P>0.05)、TNF-α(P>0.05)、γ-IFN(P<0.01)、IgG(P<0.05)、CD3<'+>CD4<'+>(P<0.01)、CD3<'+>CD8<'+>(P<0.01)和Bu-1a<'+>B細(xì)胞(P<0.01)的數(shù)量均減少。 根據(jù)GenBank登載的雞褪黑素3型受體亞型的tuRNA序列設(shè)計(jì)3

4、對引物，采用RT-PCR技術(shù)首次從鴨腦組織中克隆出褪黑素3型受體亞型的部分eDNA片段，長度分別為603bp、468bp和504bp，應(yīng)用DNAstar分析軟件進(jìn)行序列分析，結(jié)果顯示：鴨3型褪黑素受體亞型核苷酸序列與雞的對應(yīng)序列同源性較高，分別為：93.5％、95.9％和95.0％。 采用地高辛分別標(biāo)記褪黑素3型受體亞型制成eDNA探針，采用原位雜交法檢測Mella、Mellb、Mellc受體基因tuRNA在鴨脾臟、胸腺和腔上囊