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文檔簡介
1、本論文就豬血為原料同時提取血紅素、超氧化物歧化酶、凝血酶并回收珠蛋白的工藝進行了較為深入的研究，結果如下：
1.確立了超聲破碎溶血的方法及最佳條件為：功率400W，10min，紅細胞破碎率達100％；
2.采用濃鹽酸與丙酮的體積比為1:100的酸化丙酮提取血紅素，在同時提取血紅素、超氧化物歧化酶的條件下，1L全血能得到純度高達99.9％的血紅素6.0g。
3.采用熱變性法純化SOD，并確立最佳變
2、性溫度為60℃。確定了50％飽和度硫酸銨鹽析去除雜蛋白，90％飽和度硫酸銨鹽析得到SOD粗酶樣品的方法，并通過中空纖維膜超濾濃縮5倍得到SOD純品。該工藝條件下，1L全血可提取SOD50.1mg，比活達6523U·mg-1，活力回收達71％，純化倍數108.3。經SDS-PAGE電泳驗證為單一的譜帶，其分子量為32KDa。
4.以生理鹽水配制的凝血酶原溶液，以CaCl2溶液為激活劑時，其最適激活條件為：溶液中Ca2-濃度為
3、0.1mol·L-1、室溫下激活時間1.5h。
5.采用DEAE-Sephrose陰離子交換柱層析純化凝血酶，最終1L血能得到凝血酶2.05mg比活達到1810.2U·mg-1。，活力回收達49.7％，純化倍數31.5。所得凝血酶經SDS-PAGE電泳驗證為電泳純，其分子量為33，580Da，等電聚焦電泳測定其等電點為5.5左右。且血漿經－20℃冷凍處理其分離效果明顯優(yōu)于末處理血漿。
6.回收了血紅蛋白中的珠
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