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文檔簡介
1、目的：揭示氧化苦參堿保護(hù)大腸上皮細(xì)胞屏障機(jī)制。
方法：培養(yǎng)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞株(Caco-2),分別設(shè)正常對照組(不加刺激物及干預(yù)因素);損傷模型對照組(加入血小板活化因子終濃度分別為100ng/L和200ng/L);氧化苦參堿對照組(氧化苦參堿終濃度分別為100μg/ml和200μg/m1)氧化苦參堿治療組(氧化苦參堿終濃度分別為100μg/ml和200μg/ml,30 min后,加入PAF100ng/L),24h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
2、。MTT比色法檢測細(xì)胞活力。PCR法和Real-Time PCR法檢測緊密連接蛋白ZO1和Occludin mRNA表達(dá)的變化。
結(jié)果：MTT比色法檢測細(xì)胞活力顯示氧化苦參堿濃度在100μg/m1-400μg/m1之間,細(xì)胞的增值和細(xì)胞活力增加;濃度在400μg/ml-1000μg/ml之間,細(xì)胞的增值和細(xì)胞活力減弱。血小板活化因子濃度在100ng/L-6000ng/L范圍內(nèi)均未影響到細(xì)胞的增值和細(xì)胞活力。血小板活化因子作
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