一種新型絡(luò)合劑的驅(qū)鎘作用初步研究.pdf

1、鎘(Cadmium,Cd)是一種對人體有毒的金屬物質(zhì)，鎘及其化合物在工業(yè)上已經(jīng)廣泛應(yīng)用。鎘可通過職業(yè)接觸和通過“三廢”進入食物鏈轉(zhuǎn)移進入生物體內(nèi)。鎘不是人體必須元素，體內(nèi)缺乏清除鎘的有效機制，鎘有很強的蓄積性，在人體內(nèi)的半排出期長達30年。鎘有較強的毒性，急性和慢性接觸鎘，均可以引起體內(nèi)腎、肝、肺、骨骼、心血管、生殖系統(tǒng)等多組織損傷，并抑制免疫力，有致癌、致畸、致突變等作用[1，2]，被美國毒理管理委員會(ATSDR)列為第6位危及人體

2、健康的有毒物質(zhì)。
　　 然而，目前對于鎘中毒尚無肯定、有效的療法。常用的金屬絡(luò)合劑雖然可以排出鎘，但鎘在腎小管的重吸收等卻對腎臟造成更嚴重的損傷，因此不能采用在重金屬常用的驅(qū)鎘治療方法，只能以支持療法為主。所以，尋找安全、有效驅(qū)排體內(nèi)蓄積鎘的藥物，是目前亟待解決的問題。
　　 目的：
　　 對一種新合成的DTC類驅(qū)鎘藥物N-(2,3,4,5,6-五羥基己基)-(N-二取代甲酸鈉基)-L-甲硫氨酸鈉(D-3)對小鼠

3、體內(nèi)蓄積鎘的促排作用進行初探。
　　 方法：
　　 1、小鼠急性鎘中毒模型試驗對雄性NIH小鼠一次性腹腔注射氯化鎘(CdCl2)和巰基乙醇(ME)復(fù)合物(劑量分別為75.00、23.73、7.50、2.37、0.75μmol/kg/kg CdCl2及1500、474.68、150.00、47.47、15.00μmol/kg ME混合溶液)，觀察動物14天后處死。以血鎘、腎鎘及病理檢查為指標，確定復(fù)制小鼠急性鎘中毒模型的最

4、佳劑量。
　　 2、大鼠慢性腎損傷模型試驗利用正交設(shè)計表L9(34)，按照三因素三水平法，對染鎘濃度、染毒次數(shù)及末次染毒后動物處死時間這三個因素的三個不同水平進行實驗設(shè)計，對雄性SD大鼠腹腔注射CdCl2和ME復(fù)合物，劑量分別為3、6、12μmol Cd/kg及60、120、240μmol ME/kg，染毒1～5d，分別于染毒后第7、21、35天處死動物。以腎鎘、尿β2-微球蛋白、血鎘以及腎臟病理學改變?yōu)橹笜?，?yōu)選出鎘模型復(fù)制方

5、案。
　　 3、絡(luò)合劑中間體D-2、B-2驅(qū)鎘治療試驗對鎘中毒雄性NIH小鼠分別用絡(luò)合劑中間體B-2、D-2治療，觀察對比驅(qū)鎘藥物對腎鎘的促排作用及對微量元素含量影響情況。初步篩選出較理想的驅(qū)鎘絡(luò)合劑中間體D-2，然后進一步合成新的驅(qū)鎘絡(luò)合劑D-3。
　　 4、絡(luò)合劑D-3驅(qū)鎘治療試驗對鎘中毒雄性NIH小鼠分別用絡(luò)合劑D-3、B-3及EDTA治療，觀察對比驅(qū)鎘藥物對腎鎘的促排作用及對微量元素含量影響情況，進一步明確驅(qū)鎘絡(luò)

6、合劑D-3對體內(nèi)腎鎘的驅(qū)排作用，并觀察其對體內(nèi)微量元素的影響情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、小鼠急性鎘中毒模型試驗與對照組相比，全部劑量組動物均出現(xiàn)血鎘、腎鎘含量明顯升高。用75μmol/kg CdCl2+1500μmol/kg ME混合液組動物在染毒后1天全部死亡；23.73μmol/kg CdCl2+474.68μmol/kg ME混合液組及7.5μmol/kgCdCl2+150μmol/kg ME混合液組存活動物解

7、剖時均發(fā)現(xiàn)睪丸萎縮變小、甚至缺失，腎臟及睪丸均出現(xiàn)明顯病理改變。2.37μmol/kg CdCl2+47.47μmol/kg ME混合液組及0.75μmol/kg CdCl2+15μmol/kg ME混合液組動物臟器均未出現(xiàn)明顯損傷。
　　 2、鎘致大鼠慢性腎損傷模型試驗與對照組相比，實驗3組(3μmol Cd/kg+60μmolME/kg混合液，ip.5d，染毒35d后處死)在第28天β2-微球蛋白含量升高，達70.684±1

8、8.622μg/g Cr；實驗8組(12μmol Cd/kg+240μmol ME/kg混合液，ip.3d，染毒35d后處死)動物尿β2-微球蛋白含量在第35天升高，達70.304±9.776μg/g Cr。實驗6組(6μmol Cd/kg+120μmol ME/kg混合液，ip.5d，染毒21d后處死)、實驗8組(12μmol Cd/kg+240μmol ME/kg混合液，ip.3d，染毒35d后處死)及實驗9組(12μmol Cd/

9、kg+240μmol ME/kg混合液，ip.5d，染毒7d后處死)組動物腎鎘含量升高，分別為9.930±6.482、16.179±2.256、29.003±7.050μg/g濕重。實驗6組、實驗8組血鎘含量升高，達1.319±0.458、1.254±0.089μg/L。病理檢查發(fā)現(xiàn)實驗6組、實驗8組、實驗9組動物腎臟出現(xiàn)腎小管空泡變性。
　　 3、絡(luò)合劑中間體D-2、B-2驅(qū)鎘治療試驗D-2、B-2治療后能顯著降低鎘染毒小鼠腦

10、鎘含量降低；D-2治療還能降低腎鎘含量，但對血鎘含量、及肝鎘含量影響不大。D-2可以降低鎘中毒動物腦Zn、腎Ca含量，并使腎Ca接近空白對照組的水平。D-2治療后，睪丸體比與鎘對照組相比升高，差異有顯著性(P＜0.05)。而B-2治療后，體內(nèi)微量元素含量與鎘對照組相比均無顯著性差異。.
　　 4、絡(luò)合劑D-3驅(qū)鎘治療試驗用D-3對鎘中毒小鼠治療，全部動物存活，D-3治療后可以使腎鎘、腦鎘、肝鎘含量大量減少，同時能降低鎘引起的肝Z

11、n、腎Zn、肝Cu含量升高。D-3高劑量治療組(1.0 mmol/kg)動物腎、肝、睪丸均未見明顯病理改變。用EDTA對鎘中毒小鼠治療，在治療期間60％動物死亡，EDTA治療后小鼠腎鎘及肝鎘含量降低，但同時也使腎Ca明顯降低，顯著性低于正常水平；病理檢查發(fā)現(xiàn)，EDTA組動物腎臟出現(xiàn)明顯損傷，且睪丸生精小管內(nèi)細胞排列紊亂、睪丸間質(zhì)水腫。用B-3對鎘中毒小鼠治療，治療時動物尖叫、掙扎、注射后活動過度，說明藥物B-3對小鼠有刺激性，但治療期間

12、無動物死亡；B-3治療后，動物腎鎘含量降低，但微量元素與鎘對照組相比無顯著性差異。
　　 結(jié)論：
　　 對小鼠一次性腹腔注射2.37μmol/kg CdCl2+47.47μmol/kg ME混合溶液，能復(fù)制出較理想的單次染毒模型，既能使動物血鎘、腎鎘含量明顯升高，又不對動物體內(nèi)各臟器造成明顯損傷。用3.0μmol Cd/kg+60.0μmol ME/kg混合液，對SD雄性大鼠ip.染毒，連續(xù)5d，末次染毒后35d能復(fù)制出

13、腎功能性損傷、但未見病理性改變的鎘致大鼠腎損傷模型。用絡(luò)合劑中間體D-2及B-2治療鎘中毒小鼠，認為D-2比B-2驅(qū)鎘療效更好，D-2治療后能使腎鎘含量從52.67μg/g降低至41.62μg/g，下降近21％；B-2治療后腎鎘含量降低至48.44μg/g，只下降8.0％。對絡(luò)合劑中間體D-2進行進一步合成研究，得到絡(luò)合劑N-(2,3,4,5,6-五羥基己基)-(N-二取代甲酸鈉基)-L-甲硫氨酸鈉(簡稱D-3)。D-3對急性鎘中毒小鼠