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文檔簡介
1、本試驗研究目的在于探索歐李(Prunus humilis(Bge).Sok)離體快繁的有效途徑,采用其帶腋芽的莖段來誘導(dǎo)愈傷組織,通過愈傷組織分化來增殖;同時以莖尖為外植體直接誘導(dǎo)不定芽,繼而進(jìn)行增殖培養(yǎng)。試驗以單因素和復(fù)因素設(shè)計為主,對結(jié)果作方差分析及多重比較,確定了歐李組織培養(yǎng)的一系列技術(shù)參數(shù)組合,為其工廠化生產(chǎn)提供了一定的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持,研究結(jié)果表明: 1.歐李離體培養(yǎng)適宜的外植體為新枝的中部帶腋芽的莖段,其污染率低、
2、分化出芽較快。 2.歐李采樣的最佳時期為4月中旬,其萌芽率高,污染率低,無菌苗生長快;同時不同消毒時間對歐李初代培養(yǎng)有一定的影響,消毒時間8分鐘的處理無論在污染率、死亡率、萌芽率上都好于其它兩個處理,萌芽率可以達(dá)到93.3%。 3.歐李誘導(dǎo)愈傷的適宜激素組合為NAA和BA,培養(yǎng)基組成:1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.8 mg/L,其愈傷塊綠色,組織致密,量多。 4.誘導(dǎo)歐李莖尖分化的適宜培養(yǎng)基為MS+B
3、A0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其莖粗,分化好,葉片生長正常,植株較健壯,大部分植株一次性成苗。 5.MS培養(yǎng)基是繼代增殖培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基。 6.歐李增殖生長階段適宜的生長素和細(xì)胞分裂素為NAA和BA,兩者的濃度配比為NAA0.06 mg/L+BA1.0 mg/L。此外,針對歐李組培苗生長緩慢,為了保持一定的增殖系數(shù),繼代周期以45 d為宜。 7.歐李對pH的適應(yīng)范圍很廣,在pH5.8~6.2的環(huán)境
4、中都能生長,但在pH5.8時,增殖系數(shù)和平均莖伸長量都達(dá)到最大值。 8.歐李組織培養(yǎng)增殖生長需要NH<,4><'+>和NO<,3><'->的配合使用。在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上,維持較高濃度的NO<,3><'->能促進(jìn)歐李組織培養(yǎng)的增殖生長,且NH<,4><'+>/NO<,3><'->比例為1/2時增殖效果最好。 9.優(yōu)級白砂糖作為碳源對歐李增殖生長的效果與分析純蔗糖相比沒有明顯差異,從而可以大大降低組培成本。 10.針
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