微流控芯片技術(shù)分析慢性粒細胞白血病患者粒細胞髓過氧化物酶的表達.pdf

1、分類號：R446密級：學位類別：科學學位囤專業(yè)學位口◇學校代碼：10062學號：2010702107學科門類：工學又亨辛眚科鼻母TlA—JIN翻EDlCAIlIUNl垤曬lTY碩士學位論文MASTER’SDISSER，I!ALTIoN論文題目：微流控芯片技術(shù)分析慢性粒細胞白血病患者粒細胞髓過氧化物酶的表達TITLEMicrofluidicchiptechnologytoanalysetheexpressionofmyeloperoxid

2、aseinpatientswithchronicmyelogenousleukemia一級學科：生物醫(yī)學工程論文作者：曹旭東指導教師：黎小沛教授導師組成員：孫續(xù)國教授天津醫(yī)科大學研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的：慢性粒細胞白血病(Chronicmyelogenousleukemia，CML)是一種骨髓增殖性血液疾病，死亡率逐年增加，我國已經(jīng)上升到第3位。CML的診斷、分類以及預后評價等，一直按照WHO所提出的形

3、態(tài)學、細胞遺傳學的標準。但是對于慢性粒細胞白血病早期的患者，由于其原始粒細胞、早幼稚粒細胞與正常細胞形態(tài)差異并不特別明顯。因此，應用形態(tài)學診斷其準確性有一定的降低。隨著單細胞分析技術(shù)的不斷發(fā)展，證實單個細胞中化學組分的種類或某一組分的含量會隨著細胞的不同狀態(tài)而產(chǎn)生變化。有研究指出髓過氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)與許多疾病的發(fā)生相關(guān)。但是，MPO是否與慢性粒細胞白血病之間存在某種關(guān)系，目前尚不明確。本研究旨在設(shè)計出一

4、種能夠?qū)蝹€中性粒細胞進行分析的微流控芯片，探討中性粒細胞中MPO含量和活性的變化與慢性粒細胞白血病之間的對應關(guān)系，以期能夠指導CML的早期診斷。方法：(1)收集CML患者95例，分別采集靜脈血和骨髓穿刺液。健康對照組50例，分別采集靜脈血。(2)利用SYSMEXXE2100血液分析儀，測定血液RBC數(shù)量、WBC數(shù)量、Hb含量和PLT數(shù)量。(3)制備血液和骨髓涂片，利用瑞氏染液對造血細胞進行染色，依據(jù)細胞形態(tài)學對各種類型血細胞進行分類計

5、數(shù)，計算各系統(tǒng)幼稚與成熟細胞及骨髓瘤細胞的數(shù)量。(4)利用聯(lián)苯胺法對細胞中的髓過氧化物酶進行染色，計算相對酶活性。(5)設(shè)計一種能夠進行單細胞分析的微流控芯片。(6)利用設(shè)計出的芯片，對CML患者和對照組的中性粒細胞進行單細胞分析，測定髓過氧化物酶的相對表達情況。(7)探討幾種重要因素的影響作用結(jié)果：第一部分應用一般方法檢查慢性粒細胞白血病及髓過氧化物酶的情況(1)血細胞分析儀檢查的結(jié)果95例患者血常規(guī)檢查結(jié)果：白細胞：10109／L以