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文檔簡介
1、癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)疾病中一種常見病和多發(fā)病,由于神經(jīng)元突發(fā)短暫高度同步化異常放電,導(dǎo)致短暫的大腦功能障礙的一種慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病,臨床以反復(fù)發(fā)作性、短暫性、重復(fù)性、刻板性為特征,大部分癲癇患者應(yīng)用抗癲癇藥物后可以很好地控制發(fā)作,但仍有少部分患者治療效果并不理想,臨床成為藥物難治性癲癇,由于其發(fā)病機制復(fù)雜,因此一直是癲癇領(lǐng)域研究的熱點。目前研究認(rèn)為縫隙連接通道可能在癲癇的發(fā)病機制中起到重要作用,Panx-1蛋白是縫隙連接半通道蛋白,主要功能可能
2、是介導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞之間異常同步放電,ATP及Ca2+波的傳遞參與了神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡。
目的:觀察Panx-1蛋白在難治性癲癇大鼠腦海馬組織中的表達(dá)及變化規(guī)律,探討Panx-1蛋白在癲癇發(fā)生發(fā)展演變中的作用及其調(diào)節(jié)機制,從而為難治性癲癇的治療與控制尋找可能的作用途徑及藥物治療靶點。
方法:⑴動物模型的建立,選用正常成年雄性Wister大鼠,隨機分為正常對照組(n=6)與模型組(n=32),成功點燃的模型組大鼠以24
3、h,10d,21d為研究時間點隨機分為3個亞組,模型組采用氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射法,對照組用等量生理鹽水腹腔注射,根據(jù)Racine的癲癇分級標(biāo)準(zhǔn),癲癇達(dá)Ⅳ或以上納入實驗。⑵每天觀察大鼠的行為學(xué)變化,致癇后24h、10d、21d三個亞組及正常對照組大鼠分別做動態(tài)腦電圖檢測,觀察大鼠腦電發(fā)作情況。⑶各組大鼠根據(jù)時間點斷頭取腦后運用PCR、蛋白免疫印跡、免疫組化等方法觀察Panx-1蛋白在癲癇大鼠模型中的表達(dá)變化及規(guī)律,進一步探討Panx-
4、1蛋白在難治性癲癇發(fā)病中的作用。
結(jié)果:①氯化鋰-匹羅卡品致癲癇大鼠模型,造模成功率為84%,死亡率為11%,在平均經(jīng)過20.5±3.5d后,即可觀察到大鼠自發(fā)性癲癇發(fā)作,EEG在急性期表現(xiàn)為高頻率高波幅的尖棘波,靜止期未發(fā)現(xiàn)癇性波,表現(xiàn)背景波慢化,波幅增高;慢性期(第21天)EEG監(jiān)測發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)周期性的癲癇樣放電。②PCR、Western-blot、免疫組化均顯示模型組大鼠海馬Panx-1蛋白各時間點的的表達(dá)量較正常對照組
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