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文檔簡介
1、真核生物基因表達調(diào)控是分子生物學(xué)的研究熱點之一。植物基因的表達受啟動子的控制,高效表達啟動子的分離及功能分析不僅是植物基因工程研究的重要方面,也是表達調(diào)控研究的重要內(nèi)容。 本文根據(jù)EST數(shù)據(jù)克隆了一個預(yù)測在水稻莖中高效表達的啟動子Os252和兩個預(yù)測在水稻胚乳中高效表達的啟動子Os772及Os359。將這三個啟動子與GUS基因構(gòu)建成表達載體。然后采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化水稻粳稻品種日本晴(O.sativa japonica),分析這
2、些啟動子的組織特異性以及啟動基因表達強度。 轉(zhuǎn)基因水稻GUS染色及PCR鑒定結(jié)果表明,GUS基因已經(jīng)成功地整合進水稻基因組中。GUS組織化學(xué)分析表明,Os252能啟動GUS基因在水稻葉、莖以及胚乳中表達,而Os772和Os359能啟動GUS基因在水稻胚乳中表達但不能在葉子和莖中表達。進一步GUS酶活性的測定表明,葉和胚乳中Os252啟動子活性分別是35S啟動子的1.9和2.5倍,而Os772和Os359啟動子在各組織中的酶活性相
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