降鈣素對(duì)超高分子量聚乙烯顆粒誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌TNF-a、MMP-2、MMP-9的影響.pdf

1、目的:觀察降鈣素在體外對(duì)超高分子量聚乙烯（UHMWPE）顆粒誘導(dǎo)人單核白血病細(xì)胞源性巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的影響，探討降鈣素是否具有抑制巨噬細(xì)胞分泌TNF-a、MMP-2、MMP-9的作用，為降鈣素防治人工關(guān)節(jié)無(wú)菌性松動(dòng)提供理論支持
　　方法:隨機(jī)選取無(wú)菌性松動(dòng)患者翻修人工關(guān)節(jié)中的界膜組織，提取高分子聚乙烯顆粒;選取人單核白血病細(xì)胞株，加入PM

2、A，誘導(dǎo)分化出巨噬細(xì)胞;使用最終濃度為108個(gè)/ml的UHMWPE顆粒懸液刺激巨噬細(xì)胞，模擬無(wú)菌性松動(dòng)模型，同時(shí)以不同濃度的鮭魚(yú)降鈣素對(duì)巨噬細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，將巨噬細(xì)胞分成5個(gè)實(shí)驗(yàn)組:A組為空白組，單純巨噬細(xì)胞組，B組為空白對(duì)照組:UHMWPE顆粒+巨噬細(xì)胞;C組:UHMWPE顆粒+巨噬細(xì)胞+10-12mol/L濃度鮭魚(yú)降鈣素、D組:UHMWPE顆粒+巨噬細(xì)胞+10-10mol/L鮭魚(yú)降鈣素，E組:UHMWPE顆粒+巨噬細(xì)胞+10-8mol

3、/L濃度鮭魚(yú)降鈣素素;用RPMI1640培養(yǎng)液配置（100 U/ml青霉素、100 u/ml鏈霉素，2mmol/l左旋谷氨酰胺）在5％ CO2的飽和濕度、37℃的條件下培養(yǎng)48h，取上清液，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)降鈣素對(duì)巨噬細(xì)胞TNF-a、MMP-2與MMP-9蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:與空白組相比，，空白對(duì)照組中TNF-a、MMP-2與MMP-9蛋白表達(dá)顯著升高(P＜0.01)，加入10-12mol/L濃度鮭魚(yú)

4、降鈣素組的TNF-a、MMP-2與MMP-9蛋白表達(dá)稍下降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);而加入10-10mol/L、10-8mol/L濃度降鈣素組的TNF-a、MMP-2和MMP-9的蛋白表達(dá)與空白對(duì)照組相比，均有不同程度下降，10-10mol/L、10-8mol/L濃度降鈣素組TNF-a、MMP-9蛋白下降的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，10-8mol/L濃度降鈣素組MMP-2蛋白下降的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。<