關(guān)于ox-LDL誘導骨髓來源的平滑肌樣細胞體外轉(zhuǎn)分化為泡沫樣細胞的研究.pdf

1、血管平滑肌細胞是動脈粥樣斑塊中一種主要的細胞成分，在血管疾病的發(fā)展過程中起重要作用。與終末分化的骨骼肌細胞和心肌細胞不同，成年動物體內(nèi)的平滑肌細胞在局部微環(huán)境的各種因素誘導下，仍然具有高度的可塑性和可逆的表型變化特性。在早期的動脈粥樣病變中，平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化表現(xiàn)為平滑肌表面標志基因的表達減少、細胞增殖率升高以及細胞合成細胞外基質(zhì)的增加。在動脈粥樣硬化病損中，平滑肌細胞表面ox-LDL的吞噬受體表達上調(diào)能夠使其轉(zhuǎn)化為泡沫樣細胞。雖然對中

2、膜平滑肌細胞遷移和增殖的分子機制作了大量研究，但是至今仍然未能找到抑制血管阻塞性重建的有效治療方法。
　　 有研究表明骨髓間充質(zhì)干細胞是平滑肌祖細胞的一個非常重要來源，這些骨髓來源的平滑肌祖細胞能夠歸巢到血管病損處并分化為平滑肌樣細胞細胞參與冠脈搭橋術(shù)后的再狹窄、移植后再狹窄以及高脂血癥所致的動脈粥樣硬化等病變。但對于骨髓間充質(zhì)干細胞中能夠特異性分化為平滑肌系的祖細胞研究卻并不多見。其原因之一為骨髓中的平滑肌祖細胞與其他幾種祖細

3、胞系同時存在，將其分離純化存在一定困難。
　　 雖然大量研究表明ox-LDL能夠促進血管的炎癥并且促進動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，但是ox-LDL對骨髓來源的平滑肌樣細胞(SMLC)的分化和轉(zhuǎn)分化作用卻未見報道。Ox-LDL受體在骨髓來源的平滑肌樣細胞(SMLC)中是否表達以及其在動脈粥樣硬化中對平滑肌樣細胞分化所起的作用目前仍不十分清楚。本研究旨在探討ox-LDL受體LOX-1介導骨髓來源平滑肌樣細胞的轉(zhuǎn)分化作用。為骨髓源性干祖

4、細胞在動脈粥樣硬化中的作用機制提供新的實驗依據(jù)。
　　 本研究采用組織特異性啟動子結(jié)合流式分選的方法，用帶有SM22啟動子的綠色熒光蛋白質(zhì)粒重組體Psm22－eGFP-1將平滑肌祖細胞（SMPC）從骨髓間充質(zhì)干細胞中分離純化出來。分離出的平滑肌祖細胞myocardin+CD105+KDR+CD31-CD45-CD34-，但并不表達平滑肌細胞特異性的標志物（α-SMA、SM22、smoothelin和 SM-MHC)。在用PDGF

5、-BB長時間誘導后，SMPC逐漸表達α-SMA、SM22和SM-MHC而分化為平滑肌樣細胞（SMLC）。當SMLC與不同濃度ox-LDL共培養(yǎng)之后，SMLC表面的LOX-1表達隨著ox-LDL濃度升高而增多，同時myocardin和平滑肌表面特異性標志基因的表達逐漸減少。在LOX-1表達上調(diào)的同時，SMLC的吞噬功能增強，在其細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)脂滴聚集，成為泡沫樣細胞。
　　 本研究表明在骨髓間充質(zhì)干細胞中存在myocardin+C