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文檔簡介
1、目的：探討Gremlin1與腎纖維化的關(guān)系及大黃素對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮表達(dá)Gremlin1的影響。 方法：(1)在人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上。以TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化并作為陽性對(duì)照，觀察不同濃度大黃素干預(yù)轉(zhuǎn)分化細(xì)胞生長。實(shí)驗(yàn)分組：A：正常對(duì)照組(無血清培養(yǎng)基)，B：陽性對(duì)照TGF-β1(2ng/m1)，C： TGF-β 1(2ng/m1)+大黃素(10 ug/m1)，D：TGF-β1(2ng/m1)+
2、大黃素(20 ug/m1)E：TGF-β1(2ng/m1)+大黃素(40 ug/m1)。(2)處理12h、24h、48 h后，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)12h組細(xì)胞Gremlin1mRNA含量的表達(dá)；免疫印跡法(Westernblotting)檢測(cè)24h、48 h組Gremlin。蛋白的表達(dá).(3)選取不同病因的原發(fā)性腎小球腎炎腎活檢標(biāo)本40例，根據(jù)光鏡下小管間質(zhì)的病變程度評(píng)級(jí)分4組，免疫組化法檢測(cè)Gremlin1表達(dá)，與患者血肌酐水平(S
3、cr)，24h尿蛋白定量(24hRpro)進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果：(1)2ng/m1 TGF-β1刺激HK-2細(xì)胞12h、24h、48h可上調(diào)Gremlin1表達(dá)。(2)隨著大黃素濃度梯度(10 ug/ml、20 ug/m1、40 ug/m1)的增加，Gremlin1基因及蛋白表達(dá)水平逐漸下降(P<0.05).(3)正常腎組織無Gremlin。表達(dá)，纖維化腎組織Gremlin4表達(dá)增多。并且其表達(dá)量與Scr呈正相關(guān)(r=0.81
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