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文檔簡介
1、BMP-4(bone morphogenetic protein 4)是轉化生長因子β(TGF-β)超家族成員之一,具有促進軟骨和骨組織形成的作用,在治療骨折和骨缺損等方面具有極大的臨床應用價值.因此該研究利用基因工程生產人BMP-4成熟肽.采用細胞裂解液法自毛發(fā)提取基因組DNA,通過PCR法擴增出編碼人骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP-4)成熟肽的DNA序列,克隆到載體pUCm-T中.在此基礎上,將編碼人骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP-4)成熟肽的
2、基因片段分別克隆到pBV220、pGEX-3X和pET42a載體上進行原核表達,并且克隆到pIC9酵母分泌型表達載體上,為BMP-4的真核表達奠定基礎.該實驗結果顯示:1、自發(fā)根可以提取出滿足PCR需要的DNA;2、國人bmp-4基因中編碼hBMP-4成熟肽的DNA序列,與白種人的序列無差別;3、利用原核非融合表達系統(tǒng)成功的表達了重組hBMP-4成熟肽,復性后的重組蛋白有良好的生物活性;4、利用原核融合表達系統(tǒng)成功的表達了重組hBMP-
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