降脂抗氧化合劑對(duì)ApoE---小鼠5-脂氧化酶通路表達(dá)的影響.pdf

1、目的:建立ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型，觀察降脂抗氧化合劑對(duì)ApoE-/-小鼠5-脂氧化酶(5-LO)通路表達(dá)的影響，探討降脂抗氧化合劑抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制。
　　方法:選用雄性8周齡ApoE-/-小鼠40只，體重18-20g，品系C57BL/6J，隨機(jī)分為4組，分別為模型對(duì)照組、降脂抗氧化合劑低劑量組、降脂抗氧化合劑高劑量組、陽(yáng)性藥（辛伐他?。?duì)照組。選用同遺傳背景正常C57BL/6J小鼠10只，成為空白對(duì)照組。將40

2、只ApoE-/-小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后給予高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)12周。同時(shí)予空白對(duì)照組飼喂普通飼料。12周后，隨機(jī)取模型對(duì)照組及空白對(duì)照組小鼠各2只，鏡下觀察其腹主動(dòng)脈病理學(xué)改變;測(cè)量其5-LO的蛋白表達(dá)量、血清LTB4和LTD4水平。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，陽(yáng)性藥（辛伐他汀）對(duì)照組以0.05g·kg-1·d-1灌胃，降脂抗氧化合劑低/高劑量組分別含生藥17.41/69.66g·kg-1·d-1灌胃，空白對(duì)照組及模型對(duì)照組給予同體積的蒸餾水，連續(xù)灌

3、胃12周后，取血和腹主動(dòng)脈，采用H&E染色對(duì)腹主動(dòng)脈的形態(tài)學(xué)改變進(jìn)行觀察;提取腹主動(dòng)脈RNA，進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)5-LO基因的表達(dá)量，Western blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)量;采用ELISA法檢測(cè)血清中LTB4及LTD4的含量;同時(shí)，測(cè)定各組血脂和hs-CRP水平。
　　結(jié)果:與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組主動(dòng)脈中出現(xiàn)了大量的脂質(zhì)沉積，形成結(jié)晶，阻塞了大部分血管，血管壁增厚，并出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，發(fā)病嚴(yán)重。模型對(duì)照組5-LO的m

4、RNA表達(dá)量（0.591±0.036）、蛋白表達(dá)量(1.548±0.126)、血清LTB4及LTD4水平較空白對(duì)照組明顯增高(P＜0.01)。與模型對(duì)照組比較，高劑量的降脂抗氧化合劑可以下調(diào)5-LO的基因表達(dá)量(P＜0.05)，病理切片H&E染色顯示給藥降脂抗氧化合劑后，高劑量給藥組血管的組織形態(tài)較模型對(duì)照組有明顯改善，顯示出藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有較好的治療效果;血清ELISA法結(jié)果顯示高劑量的降脂抗氧化合劑可以顯著降低血清LTB4及LT