葉酸、核黃素缺乏及亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性對人類遺傳物質(zhì)穩(wěn)定性的影響.pdf

1、葉酸是人體正常發(fā)育的重要微營養(yǎng)物質(zhì)，其涉及dUMP到dTMP的合成，同時通過同型半胱氨酸(HC)合成甲硫氨酸(Met)和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的生化過程影響DNA的甲基化。在葉酸代謝中，亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)催化5，10-亞甲基四氫葉酸(5，10-methyleneTHF)向5-甲基四氫葉酸(5-methylTHF)轉(zhuǎn)化，MTHFR基因位點(diǎn)突變可導(dǎo)致MTHFR活性降低，同型半胱氨酸水平升高。黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)是

2、MTHFR的輔酶，而FAD的前體為核黃素。因此，葉酸、核黃素缺乏及MTHFR基因多態(tài)性可能對DNA結(jié)構(gòu)和DNA甲基化過程、基因表達(dá)、染色體分離等形成一定的脅迫作用。 本研究采用多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)(MultiplexPCR-RFLP)技術(shù)篩查MTHFR基因677位點(diǎn)、1298位點(diǎn)基因型在正常個體與乳腺癌患者中的多態(tài)分布特點(diǎn)；以胞質(zhì)阻滯微核分析(CBMN)研究各種MTHFR基因型個體淋巴細(xì)胞在葉酸、核黃素缺乏以及

3、不同濃度組合條件下產(chǎn)生的遺傳與細(xì)胞毒性效應(yīng)，評價不同MTHFR基因型、葉酸與核黃素不同組合對人類基因組穩(wěn)定性的影向。 研究表明： 1、677位點(diǎn)突變純合體(TT)在乳腺癌患者(n=122)和對照組(n=99)中的分布頻率分別為18.03％和9.09％，無顯著性差異；1298位點(diǎn)突變純合體(CC)在乳腺癌患者(n=119)和對照組(n=98)中的分布頻率分別為9.25％和7.15％，也未表現(xiàn)顯著性差異；677、1298位點(diǎn)

4、組合基因型在乳腺癌患者和對照組中的分布頻率無顯著性差異。 2、在本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，乳腺癌患者及對照個體遺傳損傷和細(xì)胞損傷指標(biāo)均具有以下趨勢：高葉酸低核黃素組合濃度(HFLR)＜高葉酸高核黃素組(HFHR)＜低葉酸高核黃素組(LFHR)＜低葉酸低核黃素組(LFLR)。提示在葉酸含量較低時，過量的核黃素會對細(xì)胞造成損傷。分析各種因素對損傷的貢獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，葉酸對遺傳物質(zhì)穩(wěn)定性的影響最大，乳腺癌背景及核黃素對遺傳物質(zhì)穩(wěn)定性的影響不顯著。

5、 3、本實(shí)驗(yàn)還討論了基因型、葉酸、核黃素對淋巴細(xì)胞遺傳損傷的影響及三者對造成遺傳損傷的交互作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)葉酸、677位點(diǎn)基因型對細(xì)胞遺傳損傷有顯著影響，而核黃素僅對核質(zhì)橋(NPB)的產(chǎn)生有顯著影響，三者對造成遺傳損傷的交互作用不顯著；1298位點(diǎn)基因型對細(xì)胞遺傳損傷沒有顯著影響，它與葉酸、核黃素的交互作用也對細(xì)胞遺傳損傷沒有顯著影響。 研究提示，葉酸、核黃素缺乏導(dǎo)致乳腺癌患者淋巴細(xì)胞及正常人淋巴細(xì)胞遺傳不穩(wěn)定性增加，在葉酸缺