靈芝多糖降血糖作用及其機理的研究.pdf

1、隨著人們生活水平的不斷提高,糖尿病的患病人數也與日俱增。由于糖尿病的高血糖引起的糖尿病并發(fā)癥和心血管疾病嚴重著危害人類的健康。靈芝多糖是中國傳統醫(yī)藥靈芝中最重要的活性物質之一,已有多篇關于靈芝多糖降血糖的研究。但其相關機理的報道卻較少。本論文通過提取得到的靈芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GI-PS),干預鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘導的糖尿病大鼠,以鹽酸二甲基雙胍為陽

2、性對照,研究GI-PS對胰腺組織的保護和抑制胰腺β細胞凋亡來研究GI-PS降血糖的機理。
　　 本次實驗利用傳統熱水提取法從靈芝子實體中提取得到靈芝粗多糖,利用微濾膜技術提純得到GI-PS(與企業(yè)合作購買得到)。HPLC-GPC研究顯示,GI-PS平均分子量為8849Da,紫外光譜測定顯示GI-PS可能存在少量的蛋白質,而氨基酸分析和蛋白質含量測定進一步證實GI-PS存在少量的蛋白質,推斷GI-PS為肽多糖復合物。GI-PS單糖

3、組成比例為:葡糖糖:半乳糖:阿拉伯糖:甘露糖=22.4:1.9:1.0:2.1.紅外光譜研究顯示GI-PS結構中有β-糖苷鍵,從結構上推斷可能有一定的藥理活性。
　　 通過對GI-PS的體外抗氧化性研究發(fā)現,GI-PS具有清除DPPH自由基的能力,其能力約相當于Vc的5％。用其它抗氧化性測定方法發(fā)現,GI-PS同樣也具有一定的清除超氧自由基、羥基自由基離子和還原能力,這證明了GI-PS存在一定的抗氧化性。
　　 為了研究

4、GI-PS降血糖機理,開展了動物實驗。給50只雄性SD大鼠(250±30 g,9周)單次注射65mg/kg的STZ。注射STZ72h后,尾部取血測定空腹血糖,取空腹血糖水平≥250mg/dl(13.9mmol/L),并伴有多尿和其它糖尿病的癥狀的大鼠作為糖尿病模型大鼠。將造模的成功的大鼠分為3組:D,M和G組(n=10),未經造模的大鼠(n=10)作為C組對照組。所有大鼠每天灌胃同體積溶液,具體如下:D組和C組大鼠灌胃生理鹽水,M組大鼠

5、灌胃100mg/kg/bt鹽酸二甲基雙胍(溶于生理鹽水),G組灌胃200mg/kg/bt GI-PS(溶于生理鹽水)。實驗持續(xù)八周。
　　 實驗結束后發(fā)現,G組和M組大鼠血漿中空腹血糖、甘油三酯(Triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白(Low-density lipoproteiri cholesterol,LDL-C)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,

6、BUN)和肌酐(Creatinine,Cr)的濃度(P＜0.05)顯著低于D組大鼠,而高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)濃度(P＜0.05)要顯著高于D組大鼠;同時還發(fā)現M組和G組大鼠尿液中尿糖和尿蛋白的含量顯著低于D組。通過對大鼠胰腺和腎臟組織切片發(fā)現,GI-PS和鹽酸二甲基雙胍可以改善由于STZ導致的胰腺和腎臟組織的病變。通過測定腎臟和胰腺組織內酶促抗氧化劑的含

7、量發(fā)現,M組和G組腎臟和胰腺組織內超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、過氧化氫酶(Catalase,CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)含量顯著高于D組(P＜0.05)。通過對胰腺組織內凋亡基因的相關表達發(fā)現,M組和G組胰腺組織內B細胞淋巴瘤/白血病-2基因(B cell lymphoma-Leukemia-2,bcl-2)、誘導型一氧化氮合成酶(Induc

8、ible nitric oxide synthase,iNOS)和胰腺十二指腸同源盒因子1(Pancreatic duodenal homeobox factor-1,PDX-1)的mRNA表達要顯著低于D組,而Bcl-2結合X蛋白(Bcl-2-associated X protein,bax)和casp-3的mRNA表達水平要顯著高于D組(P＜0.05)。
　　 結論:實驗中提取的分子量為8849Da的GI-PS同樣具有降低S