便攜式POCT分析儀用于DNA和肌紅蛋白檢測研究.pdf

1、POCT(point of care testing)分析儀具有快速、便捷、成本低、易于操作等特點(diǎn)，有著廣闊的應(yīng)用前景和發(fā)展空間。血糖儀和尿酸儀是目前最為常見的便攜式POCT分析儀，但它們往往局限于單一目標(biāo)物（葡萄糖或者尿酸）的檢測，這遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們的需求。本文利用酶-DNA復(fù)合物催化底物（蔗糖或黃嘌呤）生成葡萄糖或尿酸，使得這兩種便攜式POCT分析儀與其它檢測對象之間建立關(guān)聯(lián)，發(fā)展了基于便攜式POCT分析儀的DNA和肌紅蛋白的檢測新

2、方法。具體研究工作如下:
　　 1.基于尿酸儀與黃嘌呤氧化酶-DNA復(fù)合物實現(xiàn)DNA的高靈敏檢測
　　 合成了黃嘌呤氧化酶-DNA復(fù)合物，以p53 DNA和HBV DNA為目標(biāo)分子，利用尿酸儀發(fā)展了DNA檢測新方法。當(dāng)目標(biāo)DNA存在時，固定化的捕獲探針、目標(biāo)DNA和黃嘌呤氧化酶-DNA復(fù)合物三者形成夾心式結(jié)構(gòu)，然后通過黃嘌呤氧化酶催化氧化黃嘌呤生成尿酸。利用尿酸儀檢測酶催化生成的尿酸濃度，即可反映目標(biāo)DNA的濃度。該方法

3、靈敏度高，選擇性好，對DNA檢測有通用性，其檢測下限低至pmol/L。同時，該方法可用于血清樣品中DNA的檢測，并通過使用微孔陣列式芯片同時檢測多個樣品。
　　 2.基于血糖儀與蔗糖酶-核酸適配體復(fù)合物實現(xiàn)肌紅蛋白的高靈敏檢測
　　 優(yōu)化了肌紅蛋白核酸適配體的序列，合成了蔗糖酶-核酸適配體復(fù)合物，利用血糖儀發(fā)展了肌紅蛋白檢測新方法。該方法利用酶標(biāo)板表面固定的抗體捕獲肌紅蛋白，并與蔗糖酶-核酸適配體復(fù)合物形成夾心式結(jié)構(gòu)。通