復方布洛芬片有關物質及鉤藤化學成分制備研究.pdf

1、復方布洛芬片是由布洛芬和對乙酰氨基酚組成的復方制劑，用于軟組織損傷引起的疼痛，骨關節(jié)炎，肩周炎，類風濕性關節(jié)炎等。目前關于布洛芬和對乙酰氨基酚合用制劑的有關物質測定方法的文獻未見報道，為保證藥品質量的穩(wěn)定可控，本課題采用高效液相色譜法檢測復方布洛芬片中有關物質。
　　鉤藤[Uncaria rhynchophylla(Miq.)Jacks]為茜草科(Rubiaeeae)鉤藤屬(Uncaria)植物。主要分布于廣東、廣西、湖南等南方各

2、省。幾十年來隨著提取分離手段的不斷進步，有關鉤藤的化學成分研究取得了較大的成果。從鉤藤中分離出的化學成分有吲哚生物堿類、三萜類、黃酮類、香豆素類、喹喏酸皂苷類、酚類及有機酸等，其中吲哚生物堿類有105個。本課題對鉤藤所含的化學成分進行系統(tǒng)分離，得到5個化合物，并利用LC-MS和薄層色譜法對各單體化合物進行純度檢測和定性鑒別。
　　本研究是按以下步驟完成的，內容結果如下：
　　一、廣泛查閱國內外相關研究資料結合布洛芬、對乙酰氨

3、基酚兩主成份及其相關物質的結構和性質，對磷酸水-乙腈、磷酸鹽-甲醇、醋酸銨-甲醇和甲醇-水等多種流動相系統(tǒng)進行色譜分離條件的選擇研究，確定采用pH＞5.3弱酸性的磷酸鹽緩沖液水相和甲醇-乙腈混合有機相系統(tǒng)，進行復方布洛芬片有關物質的測定方法研究。通過對色譜柱、流動相組成、梯度、波長和pH值等條件優(yōu)化，得到復方布洛芬片HPLC法有關物質測定的最佳條件：C18柱（ODS）（4.6×150mm，5μm），柱溫35℃，檢測波長225nm、245

4、nm；流動相：以甲醇-乙腈(10:90)混合溶液為溶液A，磷酸鹽緩沖液（pH5.80±0.10）-溶液A(95:5)為溶液B，洗脫梯度見表3。
　　二、對建立復方布洛芬片有關物質測定的HPLC法進行耐用性、專屬性、精密度、穩(wěn)定性及定量限等方法學驗證。耐用性試驗考察色譜儀器、色譜柱、流動相組成、柱溫、流速、pH等內容；對復方布洛芬片進行了強酸、強堿、氧化、高溫、濕、光照等破壞性試驗，以驗證該方法的專屬性。對氨基苯酚、對氯苯乙酰胺和4

5、-異丁基苯乙酮采用外標法進行定量，經精密度、穩(wěn)定性、定量限和檢測限、線性與范圍、回收率試驗等方法學考察，其它單一雜質和總雜質采用主成份對照法定量。
　　三、對復方布洛芬片進行了強酸、強堿、氧化、高溫、濕、光照等破壞性試驗，并對各雜質進行來源歸屬分析，探討相關物質產生的條件和途徑。結果表明：復方布洛芬片在酸性、堿性和氧化條件下，主成分容易降解產生新的雜質，這些新雜質主要由對乙酰氨基酚產生，其中來源于對乙酰氨基酚的對氨基酚雜質可在酸性

6、和堿性破壞條件下產生。在高溫、光照和濕的環(huán)境中，復方布洛芬片性質較為穩(wěn)定，主要產生布洛芬的雜質，光照條件下會產生4-異丁基苯乙酮。故提示藥品貯存應注意避光，干燥密封，避免與酸、堿、氧化性物質接觸。
　　四、進行了鉤藤化合物單體制備研究。鉤藤鉤莖5kg，用15倍量70％甲醇、0.1％HCl回流提取3次，每次3h，濾過，合并三次提取液，減壓回收溶劑，得到鉤藤的甲醇浸膏。浸膏加適量水混勻后，用濃氨水調pH至9-10，依次用二氯甲烷、正丁