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1、目的: 胰島淀粉樣蛋自沉積和β-細胞數(shù)減少是2型糖尿病的病理特征,胰島β-細胞分泌的胰淀素是胰島淀粉樣蛋白主要成份.目前認(rèn)為胰淀素的異常聚集在2型糖尿病的胰島β-細胞損傷中發(fā)揮重要作用,但其作用機制尚不十分清楚,而組織細胞的過度凋亡是機體許多疾病發(fā)病的重要機制.為此該文的研究目的有如下幾點:1.體外觀察合成的人胰淀素(HA)在溶液中的聚集形態(tài)和特點.2.證實HA誘導(dǎo)胰島細胞凋亡.3.探討鈣離子在HA誘導(dǎo)胰島細胞凋亡途經(jīng)中的作用.4.探討
2、一些藥物對HA誘導(dǎo)胰島細胞凋亡的影響.方法:1.電鏡觀察HA在體外聚集成原纖維的形態(tài),建立<'125->I標(biāo)記HA沉降率法分析HA在體外孵育不同時間后的聚集程度.2.MTT還原分析及鈣黃綠素—AM/乙錠同型二聚體雙熒光染色計數(shù),分析HA孵育后胰島細胞的存活率.3.采用電鏡、DNA瓊脂糖凝膠電泳、Hoechst33342染色觀察HA誘導(dǎo)胰島細胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變和生化特點.4.通過fura-2/AM染色和測定細胞外<'45>CaCl<,2>
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