金雀異黃素對高糖誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細胞的保護作用.pdf

1、糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病微血管最重要的病變之一，是一種具有特異性改變的眼底病變，已經(jīng)成為糖尿病患者致盲的首位原因。研究表明視網(wǎng)膜病變與自由基介導(dǎo)的氧化損傷有關(guān)。氧化應(yīng)激反應(yīng)可調(diào)節(jié)細胞的生理功能和生化反應(yīng)，在細胞增殖分化過程中發(fā)揮重要作用，并可導(dǎo)致細胞凋亡，促進新生血管形成。人視網(wǎng)膜色素上皮細胞(retinal pigmentepithelium，RPE)處于富含血管的脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜神經(jīng)

2、上皮層之間，是視網(wǎng)膜重要的營養(yǎng)、維護、代謝組織，視網(wǎng)膜色素上皮細胞的特殊位置和功能使其易受氧化攻擊，造成氧化損傷，從而導(dǎo)致多種視網(wǎng)膜病變。 金雀異黃素(Genistein，Gen)是大豆及大豆蛋白中所含的多酚類混合物，在預(yù)防乳腺癌、前列腺癌、心腦血管等疾病中起到重要作用。以往的研究中，金雀異黃素作用機制主要集中在抑制酪氨酸激酶，調(diào)控DNA拓撲異構(gòu)酶及發(fā)揮雌激素的作用。近年來發(fā)現(xiàn)金雀異黃素還是一種理想的抗氧化劑，具有加速脂質(zhì)清除、

3、抑制自由基的產(chǎn)生，清除、熄滅自由基的作用，且其藥物毒性小，可能成為新的治療糖尿病性視網(wǎng)膜病變的方法。在此，我們主要觀察高糖對RPE細胞增殖的影響，以及Genistein對高糖誘導(dǎo)的RPE細胞的保護作用，并初步探討了Genistein對高糖誘導(dǎo)的RPE細胞的保護作用的機制。我們體外培養(yǎng)人RPE細胞，分別以Gen0、50、100、200umol/L的藥物濃度作用高糖(33mmol/L)培養(yǎng)的RPE細胞48h，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)；噻唑藍

4、比(methylthiazolyltetrazolium，MTT)檢測細胞活性；流式細胞儀檢測細胞周期；激光共聚焦顯微鏡檢測細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平；黃嘌呤氧化酶法測定細胞內(nèi)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性。 結(jié)果表明：與對照組與對照組相比，應(yīng)用含33mmol/L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基處理RPE細胞48h可見細胞胞體變薄，形態(tài)表現(xiàn)多樣，不規(guī)則

5、細胞增多；高糖可以抑制RPE細胞增殖，高糖培養(yǎng)的RPE細胞內(nèi)活性氧(ROS)產(chǎn)生明顯增多，超氧化物歧化酶活力(SOD)降低，加入金雀異黃素預(yù)處理后，可抑制細胞增殖的作用減弱，降低細胞內(nèi)活性氧(R0s)的表達，增加細胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性，各指標(biāo)差異有顯著性(P<0.01)，且金雀異黃素的作用呈劑量依賴性。 通過以上研究，我們得出下列結(jié)論： 1．高糖抑制RPE細胞的增殖，Genistein減弱高糖對細胞增殖的抑制