小牛血及血清去蛋白提取物注射液的質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、小牛血、血清去蛋白提取物注射液可以增進(jìn)與能量有關(guān)的功能性代謝和保存性代謝，對(duì)腦神經(jīng)損傷、腦中卒及腦梗塞等疾病有積極的治療效果。國(guó)外該注射液的代表產(chǎn)品是愛維治。該產(chǎn)品每年進(jìn)口額為幾千萬(wàn)美元，位列進(jìn)口藥品排名前列。近年來國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)紛紛仿制，造成了低水平重復(fù)、產(chǎn)能過剩及質(zhì)量控制疏忽等問題。加之近年來出現(xiàn)的齊二藥、“欣弗”及“魚腥草注射液”事件等，使得注射液的質(zhì)量問題日益受到人們密切的關(guān)注。出于用藥安全考慮，國(guó)家藥監(jiān)局明確指出需提高注射液的質(zhì)

2、量控制要求。由于該注射液所含成份非常復(fù)雜，現(xiàn)有的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)不能完全說明質(zhì)量問題，所以有必要豐富該注射液的質(zhì)量控制方法，以達(dá)到更好地控制該藥品質(zhì)量的目的。該工作需通過國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品質(zhì)量對(duì)比后再進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的完善。 小分子肽是該注射液的有效成份之一。本文采用了CZE和LC—MS等多種尚未被列入該藥物標(biāo)準(zhǔn)中的檢測(cè)技術(shù)對(duì)愛維治及國(guó)內(nèi)五家代表性產(chǎn)品的小肽進(jìn)行了研究，建立了該注射液小肽的RP—HPLC、CZE和LC—MS分析方法。在液相分析中優(yōu)化

3、了流動(dòng)相比例、流速等條件，采用了A相為水—乙腈—三氟乙酸(93：7：0.1)、B相為乙腈：水(4：1)、檢測(cè)波長(zhǎng)210nm、流速為0.3ml·min—1。在CZE實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化了緩沖液濃度、緩沖液pH、運(yùn)行電壓等條件，采用了pH2.5的0.1mol·L-1NaH2PO4緩沖液，電壓18kV，分離溫度25℃。結(jié)果表明，愛維治的RP—HPLC和CZE圖譜中分別有10個(gè)和8個(gè)峰，國(guó)內(nèi)產(chǎn)品的峰數(shù)不同程度少于愛維治。在液相分析的基礎(chǔ)上建立了質(zhì)譜方法，

4、結(jié)果表明，國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品共同含有5種小肽，愛維治及兩家國(guó)內(nèi)產(chǎn)品還含有其它2種小肽。小肽的分子量在300～1000Da之間，初步推斷是二肽至九肽。利用自編的程序得出小肽可能含有的氨基酸，有助于小肽的序列分析。所建立的方法準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，可作為評(píng)價(jià)企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量的方法，對(duì)國(guó)內(nèi)產(chǎn)品的質(zhì)量控制具有一定的指導(dǎo)作用。 無機(jī)鹽對(duì)人體生命活動(dòng)影響巨大，對(duì)維持人體的正常代謝及功能十分必需。本文建立了該注射液中八種常見金屬離子的原子吸收測(cè)定方法。測(cè)定

5、鉀和鈉時(shí)加入了0.2％CsCl作為消電離劑；測(cè)定銅、鐵、鋅和鉛時(shí)分別對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行了優(yōu)化，其灰化溫度分別為1000，1400，700和800℃，原子化溫度分比為2300、2500、1800、1800℃，并加了不同濃度的Mg(NO3)2和NH4H2PO4作為基體改進(jìn)劑。結(jié)果表明，國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品離子含量差異較大，國(guó)內(nèi)產(chǎn)品注射用水的硬度較高，國(guó)內(nèi)有一家產(chǎn)品的鈣、鎂和鐵離子含量明顯高于其它產(chǎn)品。本文的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為是否將常見無機(jī)金屬離子含量列入標(biāo)準(zhǔn)積累