溫州口岸病媒生物監(jiān)測調(diào)查及兩種重要病媒生物的轉(zhuǎn)錄組測序與分析.pdf

1、病媒生物是傳染病傳播的重要載體，它不僅在某一地區(qū)和國家發(fā)生危害，更可借助交通工具、集裝箱、貨物、郵件等在國際口岸間傳播，對口岸地區(qū)的衛(wèi)生安全造成嚴(yán)重威脅。浙江溫州七里港碼頭和溫州龍灣國際機(jī)場是浙南地區(qū)的重要國際港口，近年來出入出交通工具、人員、集裝箱發(fā)展迅速，加之黃熱病、寨卡病毒等蟲媒傳染病暴發(fā)，使疫情傳入我國的風(fēng)險不斷增加。本學(xué)位論文為有效防止病媒生物及蟲媒傳染病經(jīng)國境口岸傳入和傳出、維護(hù)國門生物安全，于2012-2015年在溫州七里

2、港口岸和溫州龍灣國際機(jī)場系統(tǒng)地收集病媒生物，獲得了溫州口岸病媒生物的種類、數(shù)量、分布和季節(jié)變化等資料。同時，面對口岸病媒生物防控工作的新挑戰(zhàn)，本學(xué)位論文利用高通量測序技術(shù)對重要病媒生物黑胸大蠊Periplaneta fuliginosa Serville和澳洲大蠊P.australasiae(Fabricius)進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序和初步分析工作，旨在為今后深入開展相關(guān)研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　1．溫州口岸病媒生物本底調(diào)查

3、
　　2012-2015年間，在溫州七里港碼頭共捕獲病媒生物標(biāo)本18866號，隸屬9科23屬33種。其中，鼠形動物72號，隸屬2科4屬6種，各年度平均密度分別為0.78％、1.31%、0.71%和0.46%，9月和12月是活動高峰期，優(yōu)勢種為臭鼩鼱Suncus murinus(Linnaeus,1766)，占比75.00%。蚊類5436號，隸屬2科4屬6種，各年度平均密度分別為4.04號/(臺*小時)、7.93號/(臺*小時)、8

4、.37號/(臺*小時)和6.15號/(臺*小時)，夏季為活動的高峰時期，優(yōu)勢種為致倦庫蚊Culex pipiens quinquefasciatus Say,1823，占比69.24%。蠅類13355號，隸屬4科14屬20種，各年度平均密度分別為104.00號/籠、253.80號/籠、151.94號/籠和274.50號/籠，活動高峰為7月，以大頭金蠅Chrysomyia megacephala(Fabricius,1724)、絲光綠蠅L

5、ucilia sericata(Meigen,1826)為主，分別占比50.85%和28.79%。
　　2012-2015年間，在溫州龍灣國際機(jī)場共捕獲病媒生物標(biāo)本35515號，隸屬10科19屬29種。其中鼠形動物95號，隸屬2科4屬6種，各年度平均密度為1.08%、0.91%、1.67%和0.72%，高峰期集中在6-8月，優(yōu)勢種為臭鼩鼱，占比42.11%。蚊類5342號，隸屬2科3屬5種，各年度平均密度分別為6.56號/(臺*小

6、時)、7.49號/(臺*小時)、7.47號/(臺*小時)和3.22號/(臺*小時)，活動高峰集中在夏季，優(yōu)勢種為致倦庫蚊，占比74.22%。蠅類20423號，隸屬4科10屬14種，各年度平均密度分別為312.61號/籠、257.00號/籠、276.67號/籠和288.33號/籠，活動高峰時期為7月，以大頭金蠅和絲光綠蠅為主，分別占比59.91%和24.29%。蜚蠊9655號，隸屬2科2屬4種，各年度平均密度分別為8.36號/張、8.89

7、號/張、8.83號/張和5.88號/張，發(fā)生高峰期為5-6月，優(yōu)勢種為德國小蠊Blattella germanica(Linnaeus,1767)，占比96.99%。
　　2．溫州口岸輸入性病媒生物調(diào)查
　　2012-2015年間，在溫州口岸入境集裝箱共截獲輸入性病媒生物標(biāo)本823號，隸屬4目10科19屬31種，以蠅類為主，占80.07%，其次為蜱（10.57%）和蜚蠊（8.51%），蚊類和鼠類占比較少。截獲病媒生物的集裝箱

8、來源于35個國家和地區(qū)，其中占比最高的5個國家和地區(qū)為：寧波內(nèi)支線、南非、美國、烏拉圭和澳大利亞，貨物主要為鹽濕牛皮。截獲病媒生物的高峰集中在6-10月。發(fā)現(xiàn)9種非本地種的輸入性病媒生物，分別為緋脛紋蠅Graphomya rufitibia Stein,1918、厚環(huán)黑蠅Ophyra spinigera Stein,1910、巴浦綠蠅Lucilia papuensis(Macquart,1842)、古銅黑蠅Ophyra aenescen

9、s(Wiedemann,1830)、凱氏酪蠅Piophila casei(Linnaeus,1758)、蓬勃花蜱 Amblyomma pomposum D?nitz,1909、圖蘭璃眼蜱 Hyalomma turanicum Pomerantsev,1946、麗表花蜱Amblyomma lepidum(D?nitz,1808)和彩飾花蜱Amblyomma variegatum(Fabricius,1794)。
　　2012-201

10、5年間，在溫州口岸入境船舶上共截獲輸入性病媒生物標(biāo)本80號，隸屬2目6科10屬14種，主要包括蠅類和蜚蠊，分別占52.50%和47.5%。截獲病媒生物的船舶來源于10個國家和地區(qū)，船港籍為中國、中國香港和巴拿馬的船舶攜帶輸入性病媒生物較多，截獲高峰主要集中在5-6月和9-10月。發(fā)現(xiàn)3種非本底種的輸入性病媒生物，包括藍(lán)翠蠅、厚環(huán)黑蠅和凱氏酪蠅。
　　3．黑胸大蠊和澳洲大蠊轉(zhuǎn)錄組分析
　　利用illumina測序技術(shù)對黑胸大蠊

11、Periplaneta fuliginosa Serville,1839和澳洲大蠊Periplaneta australasiae(Fabricius)進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序。其中，黑胸大蠊轉(zhuǎn)錄組信息數(shù)據(jù)量為13.63G，共獲得54964個轉(zhuǎn)錄本，總長度57753395bp；進(jìn)一步分析后獲得39576個unigene基因，總長度32297597bp，最長27693bp，平均長度816bp。將unigene依次在Swiss-Prot、NR、KE

12、GG、COG和Pfam等公共序列數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，共獲得61167個注釋結(jié)果。黑胸大蠊SNP置換（transition）33955個，顛換（transversion）16561個，篩選獲得2666條微衛(wèi)星序列。澳洲大蠊轉(zhuǎn)錄組信息數(shù)據(jù)量為7.19G，共獲得29160個轉(zhuǎn)錄本，總長度21385175bp；進(jìn)一步分析后獲得24404個unigene基因，總長度16583410 bp，最長10853bp，平均長度679bp。將unigene在Sw