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文檔簡介
1、指狀青霉是造成柑橘果實采后損失最嚴重的病原菌。因此，研究其致病機理，有效防治指狀青霉引起的病害是很有必要的。本實驗通過對農(nóng)桿菌介導指狀青霉轉化的體系進行優(yōu)化，穩(wěn)定高效地獲得大量突變轉化子，建立指狀青霉突變體庫。同時，對已獲得的轉化子進行比較分析，獲得了一株不使柑橘果實發(fā)病的突變菌株，對該菌株進行了分子分析（PCR分析、Tail-PCR分析、Southern blot等），找出T-DNA插入位點，通過RNAi技術探究突變位點的基因與指狀青
2、霉致病性的關系。主要的實驗結果如下:
1.優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導的柑橘指狀青霉轉化條件:硝酸纖維素膜(NC膜)為承載膜，農(nóng)桿菌濃度OD600=0.6～0.8，指狀青霉孢子濃度為2×106CFU/ml，共培養(yǎng)時25℃恒溫培養(yǎng)48h。此時的轉化效率最高，能達到約20-50個轉化子/皿。建立了含有一千多個轉化子的指狀青霉突變體庫。
2.通過接種已獲得的轉化子于柑橘果實上，進行對比分析，獲得了一株不使柑橘發(fā)病的菌株，通過South
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