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文檔簡介
1、研究目的:探討左乙拉西坦(Levetiracetam,LEV)對馬桑內酯(Coriarialactone,CL)致急性分離大鼠海馬神經元鈉電流增加的影響。 方法:采用7~14d的SD大鼠,雌雄不限,以胰蛋白酶法制備海馬神經元,用銀染的方法確定細胞為神經元細胞,利用膜片鉗放大器(Axopatch200B,AxonInstruments,USA)和Clampex(8.01Axon,InstrumentsUSA)軟件,采用全細胞膜片鉗
2、技術,記錄到能被河豚毒素(TTX)阻斷的內向電流,即為Na+電流,然后在細胞外液中加入CL使終濃度達到40μl/ml,CL可使Na+電流增加,將細胞分為蒸餾水空白對照組、LEV7.5μl/ml(150μmol/L)組、LEV15μl/ml(300μmol/L)組、未處理組。每組n=5;觀察LEV對電壓依賴性鈉電流增加的影響。同時應用LEV對神經元進行預處理,先在細胞外液加入LEV15μl/ml,再給予CL,與未經LEV處理組和對照組進行
3、比較,每組n=5;觀察LEV對CL所致鈉電流的增加有無保護作用。統(tǒng)計學處理采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包,自身前后進行配對t檢驗,多組間比較采用單因素方差分析。 結果:1、在海馬神經元上記錄到被1μmol/L的河豚毒素(TTX)完全阻斷內向電流。 2、加入CL后,鈉電流幅度增加,7.5μl/ml、15μl/ml和空白對照組三組最大電流值和電流密度及波幅的增加沒有統(tǒng)計學差(P>0.05),具有可比性。 3、給予7.
4、5μl/mlLEV進行干預,鈉電流的幅度仍在增加,其最大電流值與最大電流密度自身前后比較,有統(tǒng)計學差異(P<0.05,P<0.01),與未處理組比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。15μl/ml后鈉電增加增加不明顯,與7.5μl/ml比較,最大電流值、電流密度、電流增加均有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。與蒸餾水空白對照組比較,無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 4、在CL引起峰值鈉電流幅度增加后用LEV干預,得到Ⅰ-Ⅴ曲線,對加LEV前
5、后閾電位、最大激活電位進行比較,統(tǒng)計學上無差異(P>0.05)。 5、經40min15μl/mlLEV預處理的神經元在CL作用下仍有明顯的鈉電流增加,與未處理組比較,最大電流值、最大電流密度、電流增加均無統(tǒng)計學差異(P>0.05),與蒸餾水空白對照組比較,有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。 結論:1.LEV不能降低由CL造成的急性致癇海馬細胞增加的鈉電流。 2.LEV預處理也不能降低CL引起的急性致癇海馬細胞鈉電流增
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