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文檔簡介
1、本試驗著手研究牡丹種子繁殖、扦插繁殖、嫁接繁殖與組織培養(yǎng)四種最常用的繁殖技術,比較四種繁殖方法的生根差異性,以期解決組織培養(yǎng)生根困難。選用不同生長調(diào)節(jié)劑、不同材不同時間對不同牡丹品種扦插進行處理,篩選和掌握牡丹扦插的材料和方法。研究不同嫁接砧穗組合下,砧穗的融合及生根情況,篩選最佳牡丹嫁接砧穗組合。通過測定嫁接接穗接口部位、扦插插條切口部位與實生苗莖基部生根過程中韌皮部酶系POD、PPO、IAAO的活性,篩選出牡丹最適合的扦插品種和嫁接
2、砧穗組合;并測定其內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR的含量,可溶性糖、可溶性蛋白的含量,礦質(zhì)元素N、P、K含量。綜合各生理指標的動態(tài)變化,判斷扦插生根不同階段發(fā)生的時期和主要影響因子,確定牡丹嫁接融合生根過程不同階段發(fā)生的時期。為進一步選取三種繁殖方法生根關鍵時期相關基因的差異及研究其在牡丹組織培養(yǎng)中的應用和對生根的作用奠定了基礎。試驗的主要結果如下:
1.生長調(diào)節(jié)劑對扦插生根的影響
不同時期和材料對扦插生根的影響:
3、以牡丹土芽、嫩枝、一年生硬枝為插條,牡丹9月中旬一年生硬枝成活和生根率都最好。不同品種牡丹插條經(jīng)ABT-1800mg·L-1浸蘸2h后,鳳丹的平均根數(shù)、平均根長和生根率均為最高,生根率達到57.14%,死亡率為0。發(fā)現(xiàn)處理組鳳丹25d左右不定根已突破表皮,洛陽紅約29d突破表皮,空白組不定根突破表皮則需32d左右。
2.牡丹扦插生根過程中插條韌皮部生理指標變化
2.1酶活性的變化:插條經(jīng)過800mg·L-1ABT-1
4、浸蘸2h后,插穗切口處韌皮部的POD、PPO、IAAO三種酶活性的變化因品種不同而表現(xiàn)一定的差異,但其整體變化趨勢是一致的。POD活性和PPO活性整體先升高后降低;IAAO活性呈現(xiàn)先升高后降低再升高。結果表明,處理對鳳丹的促進作用優(yōu)于洛陽紅,且都優(yōu)于空白組。
2.2內(nèi)源激素含量的變化:經(jīng)過ABT-1處理的鳳丹扦插生根過程中內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR大體都先降低后上升又降低。GA和ZR的含量明顯低于IAA和ABA。IAA
5、和ZR的變化趨勢一致,ABA和GA的變化趨勢基本一致。在根原基孕育期,IAA和ZR穩(wěn)步上升,ABA和GA持續(xù)降低。在不定根大量形成階段,IAA和ZR逐步降低,ABA和GA開始升高,不定根生成之后持續(xù)上升的趨勢。
2.3可溶性糖和蛋白的變化:鳳丹在整個扦插過程中可溶性糖和可溶性蛋白含量變化大體一致,先升高后降低,又平穩(wěn)上升。在0-10d,兩種營養(yǎng)物質(zhì)均呈上升趨勢,10d后開始不斷下降,從15d開始穩(wěn)步上升。
2.4礦質(zhì)
6、元素N、P、K含量的變化:三種營養(yǎng)物質(zhì)整體都呈上升趨勢,在0-20d,三種元素都先升高后降低。20-27d大幅度上升,在25-29d持續(xù)較高含量。K元素含量的變化趨勢與P元素相似。
3.牡丹嫁接生根過程中接穗韌皮部生理指標變化
3.1酶活性的變化:三種酶活性變化趨勢差異顯著,其中“鳳丹+芍藥”組合的接穗整體活性高于其它兩種,初步推斷,“鳳丹+芍藥”的親和力在三者之中最強,其次為“洛陽紅+芍藥”組合,“鳳丹+洛陽紅”組
7、合最低。
3.2內(nèi)源激素含量的變化:IAA、ABA、GA、ZR含量大體都先升高后降低又上升。GA和ZR的含量明顯低于IAA和ABA。其中IAA和ZR在特定的時間段其變化趨勢相一致。ABA和GA在特定的時間段其變化趨勢基本一致。
3.3可溶性糖和蛋白的變化:可溶性糖和可溶性蛋白含量都大體先上升后下降再上升。嫁接前期,兩種營養(yǎng)物質(zhì)均有所上升,可溶性糖在30d達到峰值后急劇下降,在40-70d期間逐漸回升。可溶性蛋白在20
8、d第一次達到峰值后大幅度降低,30-45d大幅度回升之后趨于穩(wěn)定狀態(tài)。砧穗在30-60d可溶性糖先大幅度降低后逐漸上升,而可溶性蛋白先升高后緩慢降低。
3.4礦質(zhì)元素N、P、K含量的變化:P元素在生根過程中變化幅度較K和N劇烈,整體呈現(xiàn)先降低后上升又下降的趨勢,在嫁接的前40d逐漸降低趨勢,40-55d大幅度上升,之后緩慢降低,45-60d持續(xù)較高含量;K元素整體呈現(xiàn)上升趨勢,在0-30d持續(xù)升高,30-45d平緩變化,45-
9、55d不斷升高到峰值,之后又呈現(xiàn)降低的趨勢;N元素在40-60d逐漸上升。
4.牡丹實生苗生根過程中莖基部韌皮部生理指標變化
4.1酶活性的變化:三種酶整體都先上升后降低,又平緩上升。0-20d變化幅度都較大,之后趨于平緩??梢酝茢?,實生苗生根集中在0-20d。
4.2內(nèi)源激素含量的變化:內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR的變化有所不同。GA和ZR的含量和變化幅度明顯低于IAA和ABA。其中IAA在0-5d
10、,略有下降,5-10d不斷上升,10d達到最大值,10-20d逐漸下降,20d之后平緩上升;ABA在0-10d,持續(xù)大幅度下降,10d達到最小值,20d之后緩慢上升;ZR在0-5d小幅度下降,5-20d不斷上升,20d達到最高峰后逐漸降低,之后趨于平緩狀態(tài);GA在0-10d,小幅度上升,10-20d逐漸下降后緩慢上升。
4.3可溶性糖和蛋白含量的變化:可溶性糖含量變化不太明顯,呈小幅度上升趨勢。可溶性蛋白含量變化不穩(wěn)定,但在5
11、-20d生根階段不斷升高。
4.4礦質(zhì)元素N、P、K含量的變化:鳳丹實生苗生根過程中,P元素含量顯著高于N和K,三種營養(yǎng)物質(zhì)在0-20d整體都呈先上升后降低的趨勢,趨于穩(wěn)定狀態(tài)。P元素在生根過程中變化幅度較K和N大。
綜合以上生理指標測定的變化趨勢,可以確定鳳丹扦插枝條的生根活躍時期大致在扦插后第10-29d。其中鳳丹插穗的第15-25d大概為不定根根原基的誘導和表達期,25-29d為不定根的生長伸長期。洛陽紅的生根
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