牡丹扦插苗與嫁接苗生根過(guò)程的研究.pdf

1、本試驗(yàn)著手研究牡丹種子繁殖、扦插繁殖、嫁接繁殖與組織培養(yǎng)四種最常用的繁殖技術(shù)，比較四種繁殖方法的生根差異性，以期解決組織培養(yǎng)生根困難。選用不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、不同材不同時(shí)間對(duì)不同牡丹品種扦插進(jìn)行處理，篩選和掌握牡丹扦插的材料和方法。研究不同嫁接砧穗組合下，砧穗的融合及生根情況，篩選最佳牡丹嫁接砧穗組合。通過(guò)測(cè)定嫁接接穗接口部位、扦插插條切口部位與實(shí)生苗莖基部生根過(guò)程中韌皮部酶系POD、PPO、IAAO的活性，篩選出牡丹最適合的扦插品種和嫁接

2、砧穗組合；并測(cè)定其內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR的含量，可溶性糖、可溶性蛋白的含量，礦質(zhì)元素N、P、K含量。綜合各生理指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化，判斷扦插生根不同階段發(fā)生的時(shí)期和主要影響因子，確定牡丹嫁接融合生根過(guò)程不同階段發(fā)生的時(shí)期。為進(jìn)一步選取三種繁殖方法生根關(guān)鍵時(shí)期相關(guān)基因的差異及研究其在牡丹組織培養(yǎng)中的應(yīng)用和對(duì)生根的作用奠定了基礎(chǔ)。試驗(yàn)的主要結(jié)果如下：
　　1.生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插生根的影響
　　不同時(shí)期和材料對(duì)扦插生根的影響：

3、以牡丹土芽、嫩枝、一年生硬枝為插條，牡丹9月中旬一年生硬枝成活和生根率都最好。不同品種牡丹插條經(jīng)ABT-1800mg·L-1浸蘸2h后,鳳丹的平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)和生根率均為最高，生根率達(dá)到57.14％，死亡率為0。發(fā)現(xiàn)處理組鳳丹25d左右不定根已突破表皮，洛陽(yáng)紅約29d突破表皮，空白組不定根突破表皮則需32d左右。
　　2.牡丹扦插生根過(guò)程中插條韌皮部生理指標(biāo)變化
　　2.1酶活性的變化：插條經(jīng)過(guò)800mg·L-1ABT-1

4、浸蘸2h后，插穗切口處韌皮部的POD、PPO、IAAO三種酶活性的變化因品種不同而表現(xiàn)一定的差異，但其整體變化趨勢(shì)是一致的。POD活性和PPO活性整體先升高后降低；IAAO活性呈現(xiàn)先升高后降低再升高。結(jié)果表明，處理對(duì)鳳丹的促進(jìn)作用優(yōu)于洛陽(yáng)紅，且都優(yōu)于空白組。
　　2.2內(nèi)源激素含量的變化：經(jīng)過(guò)ABT-1處理的鳳丹扦插生根過(guò)程中內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR大體都先降低后上升又降低。GA和ZR的含量明顯低于IAA和ABA。IAA

5、和ZR的變化趨勢(shì)一致，ABA和GA的變化趨勢(shì)基本一致。在根原基孕育期，IAA和ZR穩(wěn)步上升，ABA和GA持續(xù)降低。在不定根大量形成階段，IAA和ZR逐步降低，ABA和GA開(kāi)始升高，不定根生成之后持續(xù)上升的趨勢(shì)。
　　2.3可溶性糖和蛋白的變化：鳳丹在整個(gè)扦插過(guò)程中可溶性糖和可溶性蛋白含量變化大體一致，先升高后降低，又平穩(wěn)上升。在0-10d，兩種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)均呈上升趨勢(shì)，10d后開(kāi)始不斷下降，從15d開(kāi)始穩(wěn)步上升。
　　2.4礦質(zhì)

6、元素N、P、K含量的變化：三種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)整體都呈上升趨勢(shì)，在0-20d，三種元素都先升高后降低。20-27d大幅度上升，在25-29d持續(xù)較高含量。K元素含量的變化趨勢(shì)與P元素相似。
　　3.牡丹嫁接生根過(guò)程中接穗韌皮部生理指標(biāo)變化
　　3.1酶活性的變化：三種酶活性變化趨勢(shì)差異顯著，其中“鳳丹+芍藥”組合的接穗整體活性高于其它兩種，初步推斷，“鳳丹+芍藥”的親和力在三者之中最強(qiáng)，其次為“洛陽(yáng)紅+芍藥”組合，“鳳丹+洛陽(yáng)紅”組

7、合最低。
　　3.2內(nèi)源激素含量的變化：IAA、ABA、GA、ZR含量大體都先升高后降低又上升。GA和ZR的含量明顯低于IAA和ABA。其中IAA和ZR在特定的時(shí)間段其變化趨勢(shì)相一致。ABA和GA在特定的時(shí)間段其變化趨勢(shì)基本一致。
　　3.3可溶性糖和蛋白的變化：可溶性糖和可溶性蛋白含量都大體先上升后下降再上升。嫁接前期，兩種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)均有所上升，可溶性糖在30d達(dá)到峰值后急劇下降，在40-70d期間逐漸回升。可溶性蛋白在20

8、d第一次達(dá)到峰值后大幅度降低，30-45d大幅度回升之后趨于穩(wěn)定狀態(tài)。砧穗在30-60d可溶性糖先大幅度降低后逐漸上升，而可溶性蛋白先升高后緩慢降低。
　　3.4礦質(zhì)元素N、P、K含量的變化：P元素在生根過(guò)程中變化幅度較K和N劇烈，整體呈現(xiàn)先降低后上升又下降的趨勢(shì)，在嫁接的前40d逐漸降低趨勢(shì)，40-55d大幅度上升，之后緩慢降低，45-60d持續(xù)較高含量；K元素整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，在0-30d持續(xù)升高，30-45d平緩變化，45-

9、55d不斷升高到峰值，之后又呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)；N元素在40-60d逐漸上升。
　　4.牡丹實(shí)生苗生根過(guò)程中莖基部韌皮部生理指標(biāo)變化
　　4.1酶活性的變化：三種酶整體都先上升后降低，又平緩上升。0-20d變化幅度都較大，之后趨于平緩?？梢酝茢?，實(shí)生苗生根集中在0-20d。
　　4.2內(nèi)源激素含量的變化：內(nèi)源激素IAA、ABA、GA、ZR的變化有所不同。GA和ZR的含量和變化幅度明顯低于IAA和ABA。其中IAA在0-5d

10、，略有下降，5-10d不斷上升，10d達(dá)到最大值，10-20d逐漸下降，20d之后平緩上升；ABA在0-10d，持續(xù)大幅度下降，10d達(dá)到最小值，20d之后緩慢上升；ZR在0-5d小幅度下降，5-20d不斷上升，20d達(dá)到最高峰后逐漸降低，之后趨于平緩狀態(tài)；GA在0-10d，小幅度上升，10-20d逐漸下降后緩慢上升。
　　4.3可溶性糖和蛋白含量的變化：可溶性糖含量變化不太明顯，呈小幅度上升趨勢(shì)?？扇苄缘鞍缀孔兓环€(wěn)定，但在5

11、-20d生根階段不斷升高。
　　4.4礦質(zhì)元素N、P、K含量的變化：鳳丹實(shí)生苗生根過(guò)程中，P元素含量顯著高于N和K,三種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在0-20d整體都呈先上升后降低的趨勢(shì)，趨于穩(wěn)定狀態(tài)。P元素在生根過(guò)程中變化幅度較K和N大。
　　綜合以上生理指標(biāo)測(cè)定的變化趨勢(shì)，可以確定鳳丹扦插枝條的生根活躍時(shí)期大致在扦插后第10-29d。其中鳳丹插穗的第15-25d大概為不定根根原基的誘導(dǎo)和表達(dá)期，25-29d為不定根的生長(zhǎng)伸長(zhǎng)期。洛陽(yáng)紅的生根