涼血化瘀法對紫癜性腎炎大鼠血尿、蛋白尿和腎組織Nephrin及Podocin的影響.pdf

1、過敏性紫癜（Henoch-Sch(o)nlein purpura，HSP）是兒童時期最常見的微血管炎，臨床以皮膚紫斑、腹痛或伴便血、關(guān)節(jié)疼痛、腎臟炎癥等為主要表現(xiàn)。HSP可引起多臟器損害，其中大約有20％-80％可涉及腎臟，造成紫癜性腎炎(Henoch-Sch(o)nlein purpuranephritis，HSPN)。大多數(shù)的HSPN預后尚可，但仍有部分患兒病程遷延，少數(shù)甚至發(fā)展成慢性腎功能不全，直至終末期腎病。通過對HSPN研究進

2、展的分析，發(fā)現(xiàn)目前鮮有關(guān)于HSPN模型的報道，沒有成熟的動物模型，限制了對HSP及HSPN病理機制、治療方案的探索，同時為新藥的研發(fā)帶來困難。另一方面，涼血化瘀法是中醫(yī)治療HSPN血尿及蛋白尿的主要方法，近幾年研究發(fā)現(xiàn)裂孔膜蛋白Nephrin及Podocin與腎臟疾病導致的蛋白尿關(guān)系密切，涼血化瘀法對Nephrin及Podocin的影響目前還未有相關(guān)研究。
　　目的：
　　探索并建立有效的HSPN大鼠模型，觀察丹芍顆粒Ⅲ對H

3、SPN大鼠血尿、蛋白尿和腎組織Nephrin及Podocin的影響，探討涼血化瘀法對HSPN大鼠的治療作用及其可能機制。
　　方法：
　　1.將21只SD大鼠（雄性）按隨機數(shù)字表法分為空白組、模型組、丹芍組，每組7只。模型組和丹芍組以BSA+LPS+CCl4方法造就IgA腎病模型，同時用熱性藥物灌胃造就瘀熱模型，復合成為HSPN動物模型。
　　2.丹芍組給予丹芍顆粒Ⅲ進行治療。造模及治療結(jié)束后應(yīng)用尿沉渣計數(shù)法檢測尿紅細

4、胞個數(shù)，BCA法檢測24h尿蛋白定量;光鏡下觀察腎小球系膜變化;采用間接免疫熒光法檢測腎小球Nephrin及Podocin的表達及分布;采用RT-PCR技術(shù)檢測腎組織Nephrin mRNA和Podocin mRNA的表達。
　　3.采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。
　　結(jié)果：
　　1.模型組僅2例出現(xiàn)皮下紫癜，但模型組鏡下紅細胞計數(shù)及24h尿蛋白定量均顯著高于空白組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），病理

5、結(jié)果提示造模后腎組織腎小球系膜明顯增生，腎小管腫脹，腎小球上有IgA沉積，說明造模有效;
　　2.丹芍組大鼠的尿紅細胞計數(shù)及尿蛋白定量均明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);
　　3.丹芍組大鼠腎組織病理顯示腎小球系膜增厚，但較模型組好轉(zhuǎn)，儀有少量炎癥細胞浸潤;
　　4.免疫熒光結(jié)果顯示丹芍組大鼠腎小球Nephrin表達量較模型組升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），丹芍組腎小球Podocin表達雖然較模

6、型組有上升趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;
　　5.激光共聚焦顯微鏡下模型組的腎小球Nephrin及Podocin蛋白分布不均，甚至出現(xiàn)斷裂，丹芍組大鼠腎小球Nephrin及Podocin蛋白分布較模型組有所改善;
　　6.RT-PCR結(jié)果表明丹芍組大鼠腎組織Nephrin mRNA及Podocin mRNA的表達較模型組升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.綜合模擬IgA腎病與