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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究黃芩苷對(duì)兔tenon氏囊成纖維細(xì)胞增殖及TGF-β1表達(dá)的影響,初步探討黃芩苷對(duì)抗青光眼術(shù)后濾過(guò)泡瘢痕化的治療作用。
方法:以體外培養(yǎng)的兔tenon氏囊成纖維細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,分別加入不同濃度(15,30,45,60μg/ml)黃芩苷培養(yǎng)24,48,72 h后采用MTT法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率;采用流式細(xì)胞術(shù)及半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)30μg/ml黃芩苷作用48h后成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)周期情況及TG
2、F-β1mRNA的變化;
結(jié)果:⑴體外培養(yǎng)的兔tenon氏囊成纖維細(xì)胞三天即從組織塊邊緣游離出,14天長(zhǎng)滿融合呈漩渦狀走形;⑵MTT法顯示含不同濃度(15,30,45,60μg/ml)黃芩苷的培養(yǎng)液作用于體外培養(yǎng)的兔tenon氏囊成纖維細(xì)胞24,48,72 h后,細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯受到抑制,且有時(shí)間-劑量依賴關(guān)系,即隨著時(shí)間和濃度的增加對(duì)細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng);⑶流式細(xì)胞術(shù)顯示黃芩苷能夠?qū)⒊衫w維細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯在G1期,進(jìn)入
3、S期的細(xì)胞由35.1733±1.8441(%)減少到22.1333±0.6901(%),而S期是細(xì)胞分裂的重要時(shí)期,黃芩苷可以明顯的阻滯成纖維細(xì)胞的有絲分裂進(jìn)程,從而抑制其增殖;⑷RT-PCR顯示黃芩苷濃度為30μg/ml的培養(yǎng)液作用于成纖維細(xì)胞48h后黃芩苷組TGF-β1/GAPDH相對(duì)灰度值為1.0162±0.0028,對(duì)照組為1.1502±0.0285,DMSO組為1.1241±0.0163,黃芩苷組TGF-β1的mRNA的含量明
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