神經(jīng)肽PACAP對家兔動(dòng)脈粥樣硬化血管重塑影響的動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的： 通過建立家兔實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化模型,對胸主動(dòng)脈進(jìn)行定性觀察和定量分析,探討動(dòng)脈粥樣硬化(As)血管重塑(VR)的變化規(guī)律,以及垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)對VR的干預(yù)作用及其可能作用機(jī)制。 方法： 雄性新西蘭家兔60只,隨機(jī)等分為正常對照組(簡稱C組)、As模型組(簡稱As組)及PACAP干預(yù)組(簡稱P組)。分別于實(shí)驗(yàn)的第4、8、12周末隨機(jī)處死每組家兔各5~8只,并取胸主動(dòng)脈。在上述動(dòng)脈條的頭、中

2、、尾部各截取約0.5cm長的組織作石蠟切片。HE染色的切片在光鏡下做定性觀察,并用圖像分析系統(tǒng)測量相關(guān)形態(tài)學(xué)參數(shù)。余下的動(dòng)脈條用蘇丹Ⅳ染色,作大體形態(tài)觀察。頭段動(dòng)脈切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色標(biāo)記血管平滑肌細(xì)胞α肌動(dòng)蛋白(α-SM-actin)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)標(biāo)記凋亡細(xì)胞,計(jì)算并比較As組和P組間細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)與凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果： 1.定性觀察結(jié)果顯示,C組無斑塊形成。

3、As組和P組斑塊均隨時(shí)間延長而呈進(jìn)行性加重趨勢。但P組大部分斑塊較同期同部位As組的明顯為小。 2.形態(tài)定量分析結(jié)果 ①As組VR變化規(guī)律。隨時(shí)間延長,As組斑塊面積逐漸增大,斑塊檢出率逐漸增加。且斑塊多分布于頭段,而中段、尾段依次減少(P<0.05)。管腔面積在早期斑塊形成時(shí)并無改變,晚期則明顯縮小(P<0.05)。斑塊面積及管腔面積均分別與內(nèi)彈性膜包圍面積(IELA)、外彈性膜包圍面積(EELA)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.0

4、5),IELA和EELA間也呈顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.01),但斑塊面積與管腔面積間并無直線相關(guān)關(guān)系。 ②P組結(jié)果分析。P組斑塊面積、斑塊最大厚度均小于同期As組(P<0.05),
　　
　　神經(jīng)肽PACAP對家兔動(dòng)脈粥樣硬化血管重塑影響的動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)研究斑塊檢出率也低于As組(*<0刀5)。而管腔面積大于As組(P　　3.免疫組化標(biāo)記a

5、-SM-attin,可見血管中膜及斑塊內(nèi)均有陽性細(xì)胞表達(dá),但二者形態(tài)不同。隨病變進(jìn)展,As組斑塊內(nèi)陽性細(xì)胞逐漸遷移至腔側(cè)并呈現(xiàn)帽狀結(jié)構(gòu),而P組未形成此類帽狀結(jié)構(gòu)。
　　4.細(xì)胞PI和AI分析： ①各組 AI與H相比。AS組 AI與N相比,4周末時(shí)N較 AI大(P<0.05人8周末時(shí) PI數(shù)值上較大,12周末時(shí) AI在數(shù)值上與 PI相近。P組 AI與 PI相比,4周末時(shí)N較*大(P<0.05),8周末、12周末時(shí)