慢性間歇性低壓低氧對(duì)內(nèi)源性大麻素類物質(zhì)anandamide心臟保護(hù)作用的影響.pdf

1、目的：大量研究表明，慢性間歇性低壓低氧(CIHH)具有明顯的心臟保護(hù)作用，可增強(qiáng)心臟對(duì)缺血、缺氧的耐受性，減輕缺血/再灌注對(duì)心肌的損傷，促進(jìn)缺血/再灌注后心臟舒縮功能的恢復(fù)，以及抗心律失常。有研究報(bào)道，CIHH可改變機(jī)體對(duì)某些藥物的反應(yīng)性，從而間接發(fā)揮作用。Anandamide（AEA）是一種內(nèi)源性大麻素物質(zhì)，具有抗心肌缺血、抗心律失常等心臟保護(hù)作用。但不知CIHH對(duì)AEA心臟保護(hù)作用有何影響。本研究旨在利用大鼠離體心臟缺血/再灌模型，

2、觀察CIHH對(duì)AEA抗心肌缺血/再灌損傷保護(hù)作用的影響，并探討其機(jī)制。
　　 方法：雄性成年Sprague-Dawlay(SD)大鼠隨機(jī)分為5組：間歇性低氧14天組(CIHH14)、間歇性低氧28天組(CIHH28)、anandamide組(AEA)、間歇性低氧14天加AEA組(CIHH14+AEA)和對(duì)照組(CON)。CIHH組和CIHH+AEA大鼠置于低壓氧艙，分別接受14天、28天模擬5000米海拔高度(PB=404mmH

3、g，PO2=84mmHg)的低氧處理，每天6小時(shí)。AEA和CON組大鼠除了不接受低氧處理外，其它處理均與間歇性低氧組動(dòng)物相同。
　　 大鼠麻醉固定，迅速開(kāi)胸，取出心臟，應(yīng)用Langendorff離體心臟灌流裝置制備心肌缺血/再灌注模型，即首先穩(wěn)定灌流30min，停灌30min（缺血），然后復(fù)灌60min（再灌注）。將液體小囊插入左心室，室內(nèi)壓力通過(guò)壓力換能器輸入記錄系統(tǒng)，分別描記離體大鼠心臟基礎(chǔ)狀態(tài)和缺血/再灌注狀態(tài)下不同時(shí)間的

4、心臟功能的變化。心功能指標(biāo)包括：左室發(fā)展壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)和左室壓力最大變化速率(maximal positive and negative velocity of left ventrichlar pressure，±LVdp/dtmax)。
　　 對(duì)離體大鼠心臟，分別在缺血前給予不同的藥物干預(yù)。(1)對(duì)AEA和CIHH14+AEA組大鼠離體心臟，在缺血前給予10min的AEA(2nM)預(yù)處理；(2)對(duì)

5、部分CIHH14+AEA大鼠離體心臟，在給AEA前分別給予10min的AEACB2受體阻斷劑AM630(10nM)和CB1受體阻斷劑AM251(10nM)預(yù)處理；(3)對(duì)部分CON大鼠離體心臟在缺血前分別給予10min的AM630(10nM)和AM251(10nM)預(yù)處理。
　　 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，留取各監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)心臟灌流漏出液（冠脈流量），利用分光光度計(jì)按照乳酸脫氫酶試劑盒方法測(cè)定其中乳酸脫氫酶(LDH)含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取下心臟，

6、置于液氮中冰凍保存。通過(guò)黃嘌呤氧化酶法方法，測(cè)定左心室心肌中超氧化物岐化酶（SOD）活力，通過(guò)硫代巴比妥酸法計(jì)算出丙二醛(MDA)含量。
　　 結(jié)果：
　　 (1)基礎(chǔ)狀態(tài)下，CIHH14、CIHH28、AEA、CIHH14+AEA和CON大鼠的LVDP分別為132.1±9.7、132.0±12.8、135.5±8.6、131.6±8.5和132.2±11.0；LVEDP分別為5.5±2.9、5.6±1.8、7.8±5.

7、7、5.8±3.3和5.7±2.6;+LVdp/dtmax分別為3606.4±97.1、3616.8±109.2、3610.3±116.8、3586.6±90.4和3617.3±97.9；-LVdp/dtmax分別為2536.4±87.9、2612.0±46.4、2498.4±96.4、2480.4±63.0和2500.4±80.4，各組心功能參數(shù)間均無(wú)明顯差異(P0.05)。
　　 (2)缺血后、再灌注60min時(shí)，CIHH2

8、8和CIHH14+AEA大鼠的LVDP恢復(fù)分別為52.7±6.5％和53.1±8.5％,兩者間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但明顯好于CIHH14大鼠的11.2±5.9％、AEA大鼠的8.9±5.3％和CON大鼠的10.4±4.0％(P＜0.01);LVEDP的恢復(fù)在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分別為48.3±12.3％和42.1±11.5％，兩者間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但明顯好于CIHH14大鼠的14.5±10.2％、A

9、EA大鼠的15.7±9.7％和CON大鼠的15.6±9.1％(P＜0.05);+LVdp/dtmax的恢復(fù)在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分別為38.1±2.2％和38.2±2.4％，兩者間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但明顯好于CIHH14大鼠的8.6±1.5％、AEA大鼠的8.3％±1.1％和CON大鼠的8.5±1.5％(P＜0.05)；-LVdp/dtmax的恢復(fù)在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分別為41.8±2.4

10、％和40.5±1.3％，兩者間無(wú)顯著差異，但明顯好于CIHH14大鼠的11.2±1.7％、AEA大鼠的11.5±2.1％和CON大鼠的10.7±1.3％(P＜0.05)。
　　 (3)缺血/再灌注后60min時(shí)，CIHH28和CIHH14+AEA大鼠冠脈流出液中的LDH分別為49.3±6.5和40.9±5.2，兩者間無(wú)明顯差異，但明顯低于CIHH14、AEA和CON大鼠的93.7±6.4、110.2±8.0和101.6±8.0(

11、P＜0.05)；心肌組織中SOD在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分別為229.7±6.7和239.3±6.2，兩者間無(wú)明顯差異(P0.05)，但明顯高于CIHH14、AEA和CON大鼠的160.2±6.7、170.7±7.3和181.9±4.4(P＜0.05);MDA在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分別為1.8±0.1和1.3±0.1，兩者間無(wú)明顯差異(P＞0．05)，但明顯低于CIHH14、AEA和CON大鼠的2.1±

12、0.1、2.0±0.1和2.2±0.1(P＜0.05)。
　　 (4)CB1受體阻斷劑AM251和CB2受體阻斷劑AM630對(duì)CON大鼠的心功能無(wú)影響。AM630可明顯抑制CIHH14+AEA大鼠心臟缺血后左心室功能的恢復(fù)，使LVDP、LVEDP和±LVdp/dtmax恢復(fù)率明顯降低;同時(shí)冠脈流出液LDH升高，心肌組織SOD活性降低、MDA升高。而AM251無(wú)此作用。
　　 結(jié)論：
　　 (1)28天CIHH處理

13、具有明顯的心臟保護(hù)作用，可促進(jìn)大鼠缺血/再灌注后心功能的恢復(fù)，降低冠脈流出液中的LDH含量，增加心肌組織SOD活性和降低心肌組織MDA含量。
　　 (2)14天CIHH處理和低濃度AEA對(duì)心臟均無(wú)明顯保護(hù)作用，但14天CIHH可增強(qiáng)AEA抗心肌缺血/再灌注損傷的心臟保護(hù)作用，促進(jìn)缺血/再灌注后心功能的恢復(fù)，降低冠脈流出液中LDH含量，增加心肌組織SOD活性和降低心肌組織MDA含量。
　　 (3)CIHH對(duì)AEA的加強(qiáng)作用