炭疽芽孢苗與吸附PA苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答初步觀察.pdf

1、炭疽芽孢桿菌是人畜共患炭疽病的重要病原體，是公認(rèn)的重要生物戰(zhàn)劑之一，目前人用疫苗有兩種：即炭疽減毒活芽孢苗和炭疽弱毒株無菌培養(yǎng)濾液佐劑吸附苗，自研制成功以來，已在人群中長期使用，為了深入了解炭疽疫苗的免疫應(yīng)答機(jī)制，為疫苗的開發(fā)及評(píng)價(jià)提供理論基礎(chǔ)，本研究采用炭疽芽孢桿菌兩種疫苗——A16R芽孢苗與吸附PA苗，分別從三個(gè)層面上——脾、骨髓和外周血，初步觀察炭疽兩種疫苗的免疫應(yīng)答機(jī)制。 本研究共分為三部分： 1、炭疽兩種疫苗的

2、制備及免疫效果測定，分兩部分 (1)兩種炭疽疫苗的制備和鑒定； (2)A16R芽孢苗及吸附PA苗免疫Balb/C小鼠血清抗體效價(jià)動(dòng)態(tài)觀察及抗體亞型分析； 2、A16R芽孢苗及吸附PA苗誘導(dǎo)Balb/C小鼠特異性ASCs的動(dòng)態(tài)觀察 (1)首先建立了ELISPOT檢測炭疽疫苗免疫Balb/C小鼠后抗原特異性抗體分泌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法； (2)從三個(gè)層面上，即骨髓、脾和外周血，觀察了兩種疫苗免疫Balb/C

3、小鼠后特異性ASCs的動(dòng)態(tài)變化及差異性，并結(jié)合外周血抗體效價(jià)的消長分析不同器官/部位ASCs應(yīng)答與外周血抗體效價(jià)消長之間的相關(guān)性； 3、炭疽A16R芽孢苗與吸附PA苗誘導(dǎo)Balb/C小鼠脾、骨髓及外周血中特異性Th2細(xì)胞應(yīng)答的動(dòng)態(tài)變化，并結(jié)合外周血抗體效價(jià)的消長分析不同器官/部位Th2應(yīng)答的產(chǎn)生與維持對(duì)穩(wěn)定血中抗芽孢/PA抗體的輔助作用。 結(jié)論： (1)通過對(duì)炭疽兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠外周血抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)

4、觀察，發(fā)現(xiàn)隨著兩種疫苗的加強(qiáng)免疫，小鼠血清中均可檢測到高效價(jià)的抗體水平，并維持較長時(shí)間；吸附PA苗免疫組抗體亞型分析以IgG1和IgG2b為主，IgG2a，水平較低，與對(duì)照組差異顯著；A16R芽孢苗免疫組抗體亞型分析雖仍以IgG1和IgG2b為主，亦可檢測到較高水平的IgG2a； (2)兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓和血中均可檢測到ASCs，但ASCs出現(xiàn)時(shí)間及強(qiáng)度不同，脾中最先出現(xiàn)，首先達(dá)峰值，骨髓中峰值晚于脾，但骨髓

5、中應(yīng)答維持時(shí)間較長，與外周血抗體效價(jià)的維持有一定的相關(guān)性；兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓及外周血中ASCs的動(dòng)態(tài)變化有一定差異； (3)兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓和外周血中均可檢測到抗原特異性Th2細(xì)胞應(yīng)答，但Th2應(yīng)答出現(xiàn)時(shí)間及強(qiáng)度不同，骨髓中最先出現(xiàn)，首先達(dá)峰值，且維持時(shí)間長，外周血中可檢測到較強(qiáng)的Th2應(yīng)答，且隨著脾、骨髓及外周血的Th2應(yīng)答的升高與維持，外周血抗體滴度不斷升高，且于末次加強(qiáng)免疫后60天