優(yōu)化培養(yǎng)條件下人脂肪干細(xì)胞的視網(wǎng)膜神經(jīng)保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:檢測(cè)多能成體祖細(xì)胞(MAPC)的培養(yǎng)條件對(duì)人脂肪干細(xì)胞(hADSCs)生長(zhǎng)的影響,旨在獲得更適合治療視網(wǎng)膜變性疾病的供體細(xì)胞。
　　方法:通過細(xì)胞形態(tài)觀察、MTT實(shí)驗(yàn)、克隆形成率、PCR檢測(cè)、以及成脂、成骨、成軟骨分化潛能檢測(cè)等,研究MAPC培養(yǎng)條件下hADSCs的特征,并用MAPC培養(yǎng)處理的hADSCs進(jìn)行 RCS大鼠視網(wǎng)膜下腔移植,通過視網(wǎng)膜電圖(ERG)和TUNEL檢測(cè),判斷細(xì)胞移植治療對(duì)視功能及視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的影響。

2、
　　結(jié)果:MAPC培養(yǎng)處理的hADSCs細(xì)胞增殖能力及克隆形成率均增強(qiáng),形成的克隆較大且可穩(wěn)定傳10代以上,且具有成脂、成骨、成軟骨的多向分化潛能,細(xì)胞表面標(biāo)記物及細(xì)胞因子出現(xiàn)差異表達(dá):CD140b、CD90、CD47、HGF和 PEDF顯著上調(diào),CD73、CD105和 IL-6顯著下調(diào)。與未治療的RCS視網(wǎng)膜相比,移植MAPC培養(yǎng)條件處理的hADSCs(P4)3周后,RCS大鼠的B波波幅明顯升高,外核層細(xì)胞凋亡明顯減少。