乳腺癌新輔助化療前后survivin、p53、HER-2表達(dá)變化及意義.pdf

1、乳腺癌新輔助化療(neoadjuvantchemotherapyNCT)特指乳腺癌的術(shù)前化療。自20世紀(jì)末和21世紀(jì)初幾個有影響的國際多中心隨機(jī)對照臨床研究中期結(jié)果相繼發(fā)表和報告，新輔助化療已成為治療局部進(jìn)展期乳腺癌的標(biāo)準(zhǔn)選擇。隨著人們對腫瘤生物學(xué)認(rèn)識的不斷深化，其使用范圍逐漸向早期乳腺癌擴(kuò)展。新輔助化療作為乳腺癌綜合治療中重要環(huán)節(jié)，不僅可以縮小腫瘤體積、降低腫瘤分期來實行保乳手術(shù)，并且能提供一種體內(nèi)評價化療方案有效性的方法，為術(shù)后選擇

2、化療方案奠定基礎(chǔ)，也為分子生物學(xué)指標(biāo)評價化療反應(yīng)提供體內(nèi)藥敏模型。新輔助化療有效時腫瘤細(xì)胞分子生物學(xué)變化的研究具有重要的理論和應(yīng)用價值，成為乳腺癌綜合治療研究的熱點之一。 分子生物學(xué)指標(biāo)研究乳腺癌化療效果集中在凋亡相關(guān)因子(IAP，BCL-2)癌基因(p53，HER-2)激素受體(ER/PR)耐藥相關(guān)因子(MDR、GST)及反映腫瘤細(xì)胞增殖的因子(ki-67，PCNA)等。雖然針對這些指標(biāo)表達(dá)和表達(dá)變化與新輔助化療的關(guān)系均有相關(guān)

3、研究，但各研究結(jié)果不一，目前尚無定論。Survivin作為IAP家族新成員，是迄今發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的凋亡抑制因子，在化療誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡時發(fā)揮重要作用。實驗研究顯示野生型p53對survivin在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平都具有負(fù)性調(diào)控作用，它通過結(jié)合survivin的啟動子，抑制其與E2F轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，使細(xì)胞在G2/M期凋亡，而突變型p53則正性調(diào)節(jié)survivin表達(dá)，使細(xì)胞在G2/M期停滯而不出現(xiàn)凋亡。HER-2異二聚體化后活化，通過(PI3K)

4、/AKT信號途徑激活survivin轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子NF-кB而正性調(diào)節(jié)survivin表達(dá)。但在乳腺癌病人新輔助化療對survivin、p53、HER-2表達(dá)有何影響，p53、HER-2作為survivin表達(dá)重要調(diào)節(jié)因子，在化療前后表達(dá)改變與其是否一致等尚不清楚，本研究針對這些問題作一初步探討。 研究對象和方法： 臨床病例入組標(biāo)準(zhǔn)：1、年齡70歲以下，經(jīng)空心針穿刺活檢病理檢查證實為乳腺癌；2、穿刺標(biāo)本和手術(shù)標(biāo)本可行免疫組

5、化檢測survivin、p53、HER-2蛋白表達(dá)；3、新輔助化療前標(biāo)本獲取時，病人未接受過任何內(nèi)分泌治療或局部放療；4、有可測量的乳腺原發(fā)腫瘤。5、均接受同一TE方案化療(TAX175mg/m2，EPI60mg/m2，dl，q3w)。 剔除標(biāo)準(zhǔn)：1、化療前因空芯針活檢組織太少無法完成免疫組化檢測者；2、病人因手術(shù)活檢已切除乳腺腫瘤無法進(jìn)行化療效果評價者；3、術(shù)后病理完全緩解無法與穿刺標(biāo)本比較各因子表達(dá)變化；4、因各種原因?qū)е禄?/p>

6、療不滿2個周期的病例。 本院乳腺外科自2006年1月至2007年7月共有215例乳腺癌病人接受了新輔助化療，其中139例行TE方案化療(TAX175mg/m2，EPI60mg/m2，dl，q3w)。共有92例病人符合本項研究條件入組。均為女性，24-70歲，平均年齡44.9歲；其中T114例，T255例，T320例，T43例。有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移55例，無轉(zhuǎn)移37例。所有病例新輔助化療前臨床常規(guī)檢查均未發(fā)現(xiàn)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。根據(jù)化療前腫瘤

7、大小分別給予2-4個周期化療。共完成化療2個周期10例，3個周期59例，4個周期23例。化療前、術(shù)前均行超聲或鉬鈀檢查腫瘤變化。療效評價標(biāo)準(zhǔn)：按實體瘤療效評定標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)評價化療療效。完全緩解(CR)：可見腫瘤完全消失；部分緩解(PR)：腫瘤最長徑縮小30％以上；疾病穩(wěn)定(SD)：腫瘤最長徑縮小30％以下或增長20％以下；疾病進(jìn)展(PD)：腫瘤最長徑增加20％以上。所有化療前空芯針活檢(coreneedlebiopsyCNB)標(biāo)

8、本及化療后手術(shù)切除標(biāo)本來自本科實驗室，IHC實驗標(biāo)本經(jīng)10％中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4μm厚切片，按常規(guī)免疫組化S-P法進(jìn)行survivin、p53、HER-2檢測，用半定量方法評估其表達(dá)強(qiáng)度。新鮮組織標(biāo)本置于液氮中，-80℃保存。在整體92例隨機(jī)選擇43例病人，RT-PCR檢測survivinmRNA表達(dá)。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)資料進(jìn)行統(tǒng)計分析。術(shù)后隨訪時間：2006年4月～2007年7月，共3～15個月。結(jié)果主要比較

9、2個水平：1、化療有效組和無效組新輔助化療前各因子表達(dá)情況；2、化療前后各因子表達(dá)變化。一個關(guān)系：新輔助化療前后survivin與p53、HER-2表達(dá)變化的相關(guān)性。 主要結(jié)果： 1、將化療達(dá)到完全緩解和部分緩解定義為新輔助化療有效；疾病穩(wěn)定和疾病進(jìn)展定義為無效。所有入組新輔助化療病人臨床完全緩解14例(15.2％)，部分緩解57例(62％)，疾病穩(wěn)定21例(22.8％)，疾病進(jìn)展0例，有效率77.2％。 2、化

10、療前survivin、p53、HER-2表達(dá)陽性分別為68例(73.9％)、46例(50％)、42例(45.7％)，化療后survivin、p53、HER-2表達(dá)陽性的分別為50例(54.3％)、37例(40.2％)、36例(39.1％)，化療后survivin表達(dá)陽性率顯著降低(P＜0.05)，p53、HER-2表達(dá)陽性率略有降低，未見顯著性差異(P＞0.05)；化療前survivinmRNA表達(dá)陽性31例，陰性12例，化療后surv

11、ivinmRNA陽性21例，陰性22例，化療后survivinmRNA表達(dá)陽性率顯著降低(P＜0.05)； 3、化療有效組化療前survivin、p53、HER-2表達(dá)陽性率為69％、46.5％、47.9％，化療無效組化療前survivin、p53、HER-2表達(dá)陽性率為90.5％、61.9％、38.1％。化療前survivin表達(dá)與化療效果相關(guān)(P＜0.05)，化療前p53、HER-2表達(dá)與化療效果未見相關(guān)性(P＞0.05)。

12、短期隨訪期間所見3例遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、1例原處胸壁復(fù)發(fā)均survivin表達(dá)陽性。 4、根據(jù)半定量評分等級，化療后survivin、p53、HER-2表達(dá)降低分別為31例、39例、32例，未變化分別為36例、30例、30例，表達(dá)升高分別為25例、23例、30例。survivin不同表達(dá)改變與p53、HER-2表達(dá)改變未見相關(guān)性(p值分別為0.327、0.109)?；熀髎urvivin、p53、HER-2表達(dá)降低組化療有效率分別為90.

13、3％、82.1％、81，3％、未變化組分別為77.8％、73.3％、80％，表達(dá)升高組分別為60％、73.9％、70％，化療后survivin不同表達(dá)改變與療效有相關(guān)性(P＜0.05),p53、HER-2不同表達(dá)變化與化療效果未見相關(guān)性(P＞0.05)。 主要結(jié)論： 1.化療前survivin表達(dá)與TE方案化療療效相關(guān)，survivin表達(dá)陰性化療有效率高；p53、HER-2表達(dá)與化療效果未見相關(guān)性。提示survivin

14、表達(dá)陰性患者可能受益于TE方案聯(lián)合化療。 2.化療后survivin表達(dá)陽性率顯著降低，該變化見于轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平；化療后survivin不同表達(dá)變化與療效相關(guān)，其表達(dá)降低組、未變化組、升高組化療有效率依次遞減。化療后p53、HER-2表達(dá)陽性率未見顯著性變化，其不同表達(dá)變化與療效亦未見相關(guān)性。提示檢測sirvivin表達(dá)水平改變可能有助于TE方案療效評估。 3.雖然實驗顯示p53、HER-2是survivin表達(dá)正性