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文檔簡介
1、目的:探討COX-2表達與鋁鹽致海馬神經(jīng)元損傷之間的關系。
方法:離體原代海馬神經(jīng)元培養(yǎng)7天,給予鋁鹽(終濃度200μmol·L-1)建立鋁負荷致大鼠海馬神經(jīng)元損傷模型,以神經(jīng)元轉染COX-2過表達腺病毒(MOI=100)/COX-2RNA干擾腺病毒(MOI=100)、給予COX-2抑制劑美洛昔康(10-8mol·L-1、10-7mol·L-1和10-6mol·L-1)進行干預處理,采用生化酶學方法檢測海馬神經(jīng)元MTT值、
2、LDH漏出率、SOD活性及MDA含量,HE染色及熒光顯微鏡觀察海馬神經(jīng)元病理形態(tài)變化,RT-PCR和Western Blotting檢測COX-2的mRNA和蛋白表達水平。
結果:
(1)鋁鹽負荷導致海馬神經(jīng)元細胞數(shù)目減少、胞體和突起損傷;MTT值和SOD活性明顯下降,LDH漏出率和MDA含量明顯增加;COX-2mRNA和蛋白的表達明顯增加。
(2)COX-2過表達腺病毒轉染的神經(jīng)元COX-2
3、mRNA和蛋白表達增加,MTT值、SOD活性、LDH漏出率、MDA含量,以及神經(jīng)細胞形態(tài)結構沒有顯著異常改變。而在鋁鹽負荷基礎上同時轉染COX-2過表達腺病毒,海馬神經(jīng)元的損傷更加嚴重;MTT值和SOD活性下降更明顯,LDH漏出率和MDA含量明顯上升。
(3)美洛昔康能劑量依賴性地顯著改善鋁鹽致海馬神經(jīng)元病理性損傷,明顯阻遏鋁負荷神經(jīng)元MTT值、SOD活性的降低和LDH漏出率、MDA含量的增加,同時下調COX-2 mRNA
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