蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)胃癌相關(guān)蛋白的篩選及鑒定.pdf

1、授予單位代碼學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0459200612026100101006級(jí)公開文學(xué)論大位州學(xué)鄭士碩(科學(xué)學(xué)位)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)胃癌相關(guān)蛋白的篩選及鑒定院系名稱:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:人體解剖與組織胚胎學(xué)作者姓名:呼琳導(dǎo)師姓名、職稱:張欽憲教授二零零九年四月鄭州大學(xué)2009屆碩卜學(xué)位論文蛋自質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)胃癌相關(guān)蛋白的篩選及鑒定離解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI一TOF一Ms)獲取膚質(zhì)量指紋圖譜(PMF)，通過(guò)生物信息學(xué)技術(shù)在蛋白質(zhì)數(shù)

2、據(jù)庫(kù)進(jìn)行搜索，對(duì)選取的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定，進(jìn)而確定胃癌相關(guān)蛋白的候選蛋白。5.用westemBlot技術(shù)對(duì)鑒定出的蛋白51OOAg在胃癌組織及癌旁組織的表達(dá)情況分析。結(jié)果1.對(duì)胃癌組和癌旁組總蛋白樣品分別進(jìn)行3次2一DE，平均檢測(cè)到的蛋白點(diǎn)數(shù)分別為胃癌組737士33個(gè)，癌旁組713士29個(gè)，匹配率分別為81.1%和87.0%同一胃癌組織的3塊不同凝膠之間蛋白質(zhì)點(diǎn)在等電聚焦(Isoeleetricfocusing，IEF)方向的偏差是(l.2

3、3士0.27)mm，在十二烷基磺酸鈉聚丙烯酞胺凝膠電泳(Sodiumdodeeylsulfate一polyaerylamidegeleleetrophesis，SDS一PAGE)方向上的偏差為(1.49士0.35)mm。2.胃癌組織和癌旁組織雙向電泳圖譜經(jīng)ImageMasterZDplatinum6.0軟件進(jìn)行分析，共篩選出42個(gè)表達(dá)不同的蛋白點(diǎn)。3.對(duì)制備凝膠中差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定和蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，鑒定出的10種蛋白分別是:510

4、0鈣結(jié)合蛋白AS、原肌球蛋白1、膠轉(zhuǎn)蛋白、F一actin加帽蛋白al亞基、5100鈣結(jié)合蛋白Ag、熱休克蛋白27、反應(yīng)調(diào)節(jié)因子、Profilin、熱休克蛋白60和細(xì)胞骨架蛋白10。4.WestemBlot結(jié)果顯示SlooAg在人胃癌組織中高表達(dá)，而在癌旁組織低(無(wú))表達(dá)，與蛋白質(zhì)組學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果相同。結(jié)論1.建立人胃癌組織與癌旁組織的雙向凝膠電泳圖譜，并鑒定出10種胃癌相關(guān)蛋白的候選蛋白，為下一步研究作基礎(chǔ)。2.SIOOAg在人胃癌組