八肽膽囊收縮素對大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的 應(yīng)用原代分離培養(yǎng)的SD新生鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞興奮毒性損傷模型，研究八肽膽囊收縮素(CCK-8)對谷氨酸誘導(dǎo)的大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用，以及凋亡過程中對神經(jīng)生長因子(NGF)表達(dá)的影響，為腦損傷的治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 采用神經(jīng)細(xì)胞原代分離培養(yǎng)技術(shù)，以谷氨酸誘導(dǎo)新生大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡為細(xì)胞模型。分為正常對照組、模型組(谷氨酸處理組)、實(shí)驗(yàn)組A(CCK-8濃度1×10一6mol／L)、實(shí)驗(yàn)組

2、B(CCK-8濃度1×10一7mol／L)、實(shí)驗(yàn)組C(CCK-8濃度1×10一8mol／L)。用熒光顯微鏡觀察凋亡形態(tài)學(xué)，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測NGF蛋白表達(dá)，原位雜交技術(shù)檢測NGFmRNA表達(dá)，原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測凋亡。 結(jié)果 (1)實(shí)驗(yàn)組A、B的神經(jīng)細(xì)胞凋亡率與模型組比較降低，差異有顯著性意義(P<0．05)，且神經(jīng)細(xì)胞凋亡率與CCK-8濃度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，即CCK-8濃度越高，神經(jīng)細(xì)胞凋亡率越小。實(shí)驗(yàn)組C與模

3、型組比較則沒有明顯差異(P>0．05)； (2)實(shí)驗(yàn)組A、B的NGF蛋白表達(dá)和NGFmRNA表達(dá)與模型組比較增高，差異有顯著性意義(P<0．05)，且NGF蛋白和mRNA表達(dá)與CCK-8濃度呈正相關(guān)關(guān)系，即CCK-8濃度越高，NGF蛋白和mRNA表達(dá)越強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)組C和模型組比較則沒有明顯差異(P>0．05)。 結(jié)論 (1)外源性CCK一8可以抑制谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷的程度，對興奮毒性誘導(dǎo)的神經(jīng)