FSH對支持細胞增殖相關基因表達的影響.pdf

1、睪丸支持細胞位于曲精細管中，是精子發(fā)生的微環(huán)境的主要構成。許多激素和影響因子都參與了睪丸支持細胞增殖調控，其中FSH是調節(jié)睪丸支持細胞增殖進程的重要激素之一。因此，研究FSH對犢牛睪丸支持細胞增殖的調節(jié)機制不僅能為人工調控支持細胞增殖奠定一定基礎，而且對提高雄性動物的生殖能力也具有十分重要的意義。
　　本實驗以新生犢牛睪丸為實驗材料，利用胰酶、膠原酶兩步消化法對支持細胞進行分離，差速貼壁法純化支持細胞，進行孚爾根染色法、HE染色法

2、以及油紅O染色法鑒定支持細胞;以培養(yǎng)的犢牛支持細胞為實驗材料，用不同濃度的FSH(0、0.01、0.02、0.04、0.08IU/ml)對支持細胞進行處理，利用CCK8檢測五組濃度6個時間點支持細胞增殖情況并用Realtime-PCR檢測一定濃度FSH處理后CDC25等基因表達情況。
　　兩步酶法可以對犢牛睪丸支持細胞進行分離純化，經孚爾根染色等方法鑒定純度大于95％;體外培養(yǎng)條件下的支持細胞能夠傳至第20代，并且隨著傳代次數(shù)的增

3、加，支持細胞的增殖速度越來越慢。
　　FSH可以顯著提高睪丸支持細胞體外增殖的效率，0.04IU/ml的FSH能顯著地促進支持細胞體外增殖。
　　FSH顯著促進WNT/β-catenin信號通路相關基因表達量的提高，可以通過該信號通路促進支持細胞的增殖。
　　FSH對CDC25A基因表達影響不顯著，在一定濃度范圍內，F(xiàn)SH顯著促進CDC25B的表達。CDC25B可能參與促進支持細胞增殖作用，其可能決定支持細胞的增殖速度