丙烯腈對(duì)雄性小鼠生殖毒性研究.pdf

1、目的：探討丙烯腈(Acrylonitrile，AN)對(duì)雄性小鼠生殖系統(tǒng)的影響及其機(jī)制，為有效保護(hù)AN職業(yè)暴露人群的健康提供依據(jù)。
　　 方法：將250只成年健康SPF級(jí)昆明種雄性小鼠，按體重隨機(jī)分為陰性對(duì)照(生理鹽水0.01ml/g)、低劑量(AN1.25mg/kg，1/24LD50)、中劑量(AN2.50mg/kg，1/12LD50)、高劑量(AN5.00 mg/kg，1/6 LD50)和陽性對(duì)照(環(huán)磷酰胺40mg/kg)，5

2、組，每組50只小鼠。陰性對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，AN染毒組腹腔注射不同濃度AN，每天1次，連續(xù)5d；陽性對(duì)照組腹腔注射環(huán)磷酰胺1次。各劑量組注射劑量均為0.01ml/g體重。于首次注射后笫7、14、21、28、35d(即7d組、14d組、21d組、28d組和35d組)，采用頸椎脫臼法每組分批處死10只小鼠，取材。(1)采用WLJY-9000型偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)測定精子密度、活動(dòng)率及運(yùn)動(dòng)參數(shù)；放射免疫法(RIA)檢測血清中睪酮(T)

3、、促黃體生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)水平。(2)分光光度法檢測睪丸組織中乳酸脫氫酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)的活性。(3)光鏡和電鏡分別觀察小鼠睪丸組織的形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的改變。(4)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測小鼠睪丸生精細(xì)胞各種倍體細(xì)胞及細(xì)胞周期。
　　 結(jié)果：(1)精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)和性激素變化：同一時(shí)間不

4、同劑量組間比較，精子密度及活動(dòng)度、運(yùn)動(dòng)速度參數(shù)、運(yùn)動(dòng)方式參數(shù)和空間位移程度參數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。同一劑量不同時(shí)間組間比較，①AN低劑量組：7d組精子密度明顯升高，精子活力降低程度較大；14d組精子密度明顯降低，精子活力和活率升高；21d組精子活力降低。②AN中劑量組：21d組精子活力及活率升高幅度較大。③AN高劑量組：7d組精子活率降低明顯。21d AN中劑量組T水平與陰性對(duì)照組比較降低明顯(P＜0.05)。(2)生化

5、改變：同一時(shí)間不同劑量組間比較，①7d：AN低劑量組LDH與其余劑量組比較明顯升高(P＜0.01)，AN中劑量組較陰性對(duì)照組、AN高劑量組顯著降低(P＜0.01)；AN中劑量組ACP與陰性對(duì)照組比較明顯降低(P＜0.05);AN中、高劑量組GSH活性較陰性對(duì)照組、AN低劑量組明顯降低(P＜0.01)。②21d組：AN高劑量組LDH與陰性對(duì)照組比較顯著升高(P＜0.05)；AN中劑量組MDA活性較其余各劑量組高(P＜0.01)；AN高劑量

6、組T-AOC活性與陰性對(duì)照組、AN低劑量組顯著升高(P＜0.01)。③28d組：AN高劑量組GSH酶活力與陰性對(duì)照組比較，明顯降低(P＜0.05)。④35d組：AN中劑量組、AN高劑量組的MDA活性與陰性對(duì)照組及AN低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；AN低劑量組SOD的活性與AN中劑量組比較明顯降低(P＜0.05)。同一劑量不同時(shí)間組比較，①AN低劑量組：LDH7d及14d組升高幅度較大，ACP活力隨著時(shí)間的延長降低程度趨于

7、減小，MDA21d組升高幅度相對(duì)較大，SOD21d組活性升高明顯。②AN中劑量組：LDH7d較28d與35d組降低幅度大，ACP活力7d組降低最明顯，AKP28d及35d組明顯降低，MDA及SOD21d組升高幅度較大，GSH7d組降低最明顯。③AN高劑量組：LDH7d組較其余時(shí)間段變化幅度大，AKP及SOD21d組升高幅度較大，35d組MDA升高幅度最大，GSH7d組降低最明顯。(3)組織結(jié)構(gòu)變化：光鏡下觀察染毒組小鼠睪丸組織曲細(xì)精管萎

8、縮，管腔內(nèi)各種生精細(xì)胞明顯減少，間質(zhì)細(xì)胞排列稀疏，分裂異常，出現(xiàn)空泡和凋亡，間質(zhì)水腫，且染毒后第7d小鼠睪丸組織變化較大；電鏡下可見各時(shí)間組都有一定的改變，主要表現(xiàn)為間質(zhì)細(xì)胞顆粒增多、線粒體擴(kuò)張，支持細(xì)胞水腫，精子細(xì)胞內(nèi)形成空泡等。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠睪丸組織各倍體細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞周期各時(shí)相生精上皮細(xì)胞、不同倍體細(xì)胞比值，各劑量組與對(duì)照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：(1)染毒早期精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)對(duì)AN較敏感；A