河北香菊化學(xué)成分的研究.pdf

1、菊花為菊科植物菊花(Chrysanthemum morifoliumRamat)的干燥頭狀花序，是傳統(tǒng)中藥，具有散風(fēng)清熱、平肝明目、解毒、降壓之功效。菊花原產(chǎn)中國(guó)，我國(guó)各地均有栽培，品種繁多。在不同的生態(tài)環(huán)境下經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期人工栽培選育，加之特殊的加工方法，形成了各具特色的藥用品種。目前，我國(guó)主流藥用菊花主要有杭白菊、毫菊、滁菊、貢菊、濟(jì)菊、祁菊、黃菊和懷菊八大類。河北香菊是河北省農(nóng)科院藥植所研究培育的菊花新品種，也是目前國(guó)內(nèi)唯一的濃香型菊花

2、。其揮發(fā)油含量達(dá)1.6％，是同類菊花含量的3倍左右；總黃酮含量為5.1％，明顯高于同類菊花。由于河北香菊的揮發(fā)油及總黃酮含量均明顯高于同類產(chǎn)品，極具研究開(kāi)發(fā)價(jià)值。本課題組的前期研究表明，河北香菊總提物有顯著降血壓作用，為了找到降血壓的有效部位及有效成分，本課題在藥理實(shí)驗(yàn)的跟蹤指導(dǎo)下，對(duì)河北香菊的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。并對(duì)一個(gè)較好的降壓活性部位-60％乙醇部位總黃酮的含量進(jìn)行了測(cè)定。 目的： 1 對(duì)河北香菊的化學(xué)成分進(jìn)

3、行系統(tǒng)研究，利用硅膠柱層析、硅膠薄層層析、聚酰胺柱層析及葡聚糖凝膠柱層析等對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，得到單體化合物。利用UV、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR、DEPT、MS等技術(shù)對(duì)各單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定各化合物的結(jié)構(gòu)，為尋找河北香菊的降血壓活性部位及活性成分提供基礎(chǔ)性研究。 2 對(duì)活性部位-60％乙醇部位總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定，為該部位的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。 方法： 1 河北香菊化學(xué)成分的提取與

4、分離預(yù)實(shí)驗(yàn)：取干燥菊花100g，用1500 mL 95％乙醇，采取熱回流法，提取兩次(第一次800 mL，第二次700 mL)，每次1.5小時(shí)。分別制成總提物浸膏、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各部位浸膏，計(jì)算出膏率。 2 河北香菊化學(xué)成分的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定：用15倍量的95％乙醇，采取熱回流法，提取兩次(第一次8倍量，第二次7倍量)，每次1.5小時(shí)。適當(dāng)減壓濃縮提取液得總提物。將一部分總提物留做藥理實(shí)驗(yàn)，其余總提物依次用石油醚、

5、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓濃縮后得相應(yīng)各部位。將各部位的一部分做藥理實(shí)驗(yàn)用，其余做化合物的系統(tǒng)分離純化。利用硅膠柱層析對(duì)各部位進(jìn)行初步分離后，采用硅膠柱層析、硅膠薄層層析、聚酰胺柱層析及葡聚糖凝膠柱層析相結(jié)合，對(duì)初步分離所得粗沉淀進(jìn)一步分離與純化。于石油醚部位得化合物Ⅰ～Ⅲ。乙酸乙酯部位得化合物Ⅳ～Ⅶ。正丁醇部位得化合物Ⅷ、Ⅸ。運(yùn)用化學(xué)方法和UV、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR、DEPT、MS等技術(shù)對(duì)各單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

6、 3 采用D101型大孔吸附樹(shù)脂富集了河北香菊70％乙醇提取物中總黃酮，并用蒸餾水洗脫，至流出液Molish反應(yīng)呈陰性；再用60％乙醇洗脫，得60％乙醇部位。利用紫外分光光度法(UV)，以金合歡素-7-O-β-D-葡萄糖苷為對(duì)照品，對(duì)60％乙醇部位總黃酮含量進(jìn)行了定量分析。 結(jié)果： 1 河北香菊化學(xué)成分的提取與分離預(yù)實(shí)驗(yàn)：95％乙醇提取物總出膏率為30.0％，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各部位的出膏率分別為：6.4％

7、、9.2％、6.1％。并且通過(guò)薄層色譜檢識(shí)，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位、正丁醇部位含有多種黃酮類化合物。 2 河北香菊化學(xué)成分的研究：通過(guò)溶劑提取法和色譜分離法得到9個(gè)單體化合物，經(jīng)波譜學(xué)鑒定了7個(gè)化合物，分別為：β-谷甾醇(Ⅱ)、金合歡素(Ⅳ，)、3，5，3’-三羥基-6，7,4’-三甲氧基黃酮(Ⅴ)、香葉木素(Ⅵ)、芹菜素(Ⅶ)、金合歡素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅸ)。 3 從D10

8、1型大孔吸附樹(shù)脂柱所得60％乙醇部位總黃酮含量的測(cè)定：利用紫外分光光度法，在波長(zhǎng)為328nm下，測(cè)得60％乙醇部位總黃酮含量平均值為37.35％。 結(jié)論：在河北香菊化學(xué)成分的系統(tǒng)研究中所用提取溶劑和提取方法恰當(dāng)，利用硅膠柱層析、硅膠薄層層析、聚酰胺柱層析及葡聚糖凝膠柱層析、重結(jié)晶等方法相結(jié)合對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了較好的分離與純化；經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定的7個(gè)化合物均為首次從河北香菊中獲得。采用D101型大孔吸附樹(shù)脂富集其70％乙醇提取物的總黃酮