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文檔簡介
1、目的:研究水柳皂苷用于治療痛風的藥效學作用,并對其抗痛風的作用機制進行初步探討。
方法:(1)采用大鼠自身對照的方法,以苯溴馬隆為陽性對照藥,分別用水柳皂苷3個劑量組連續(xù)灌胃給藥3天,用大鼠代謝籠收集灌胃給藥后8小時的尿液,測定尿酸和尿量,評價該藥的促尿酸排泄作用。(2)以尿酸鈉誘導的大鼠急性痛風性關節(jié)炎為實驗模型,分別灌胃給藥水柳皂苷與秋水仙堿,觀察給藥前后對大鼠關節(jié)腫脹的影響,蘇木精-伊紅染色觀察關節(jié)內滑膜病理組織學變化,
2、酶聯(lián)免疫吸附法測定病變關節(jié)滑膜組織中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)水平的改變,評價該藥對急性痛風性關節(jié)炎的治療作用。(3)取大鼠滑膜組織進行體外培養(yǎng),分別加入不同濃度尿酸鈉溶液培養(yǎng)24h后,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測滑膜細胞中TNF-α、IL-10的含量。大鼠滑膜細胞在0.16mg/mL尿酸鈉溶液的刺激下,加入不同濃度水柳皂苷溶液干預,以不合藥模型組進行對照,觀察TNF-α、IL-10含量的改變。
結果
3、:(1)水柳皂苷組與正常對照組相比,給藥后第1d能有效促進大鼠尿酸的排泄(P<0.05),此后尿酸排泄量下降。(2)水柳皂苷高、中劑量組在造模后48h腫脹指數(shù)與模型組相比下降明顯(P<0.05),中劑量組在72h時仍有差異(P<0.05),秋水仙堿組在造模后24h、48h、72h腫脹指數(shù)相比模型組有顯著差異(P<0.05)。與正常組相比,模型組滑膜細胞充血、水腫,炎癥細胞浸潤,水柳皂苷和秋水仙堿均可不同程度緩解炎癥反應,可減少炎癥細胞浸
4、潤,水腫、充血不明顯。造模后72h,與模型組相比,水柳皂苷和秋水仙堿均可顯著降低滑膜組織TNF-α水平(P<0.01);水柳皂苷高、中劑量組和秋水仙堿可升高IL-10水平(P<0.05)。(3)采用組織決法培養(yǎng)大鼠滑膜細胞,傳3代可得型別均一的成纖維樣滑膜細胞。尿酸鈉濃度與滑膜細胞TNF-α水平之間呈正相關關,與IL-10的水平之間存在負相關,確定尿酸鈉濃度為0.16mg/mL。水柳皂苷干預后,其濃度與TNF-α的含量之間呈負相關,與I
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