腸型放射病小鼠模型中小腸細胞死亡類型的鑒定和修飾性p53蛋白的表達研究.pdf

1、目的:放射治療是腫瘤治療的三大主要手段之一，其中70％的惡性腫瘤可以進行放射治療。在許多腹腔惡性腫瘤放療過程中病人會出現(xiàn)腸道癥狀，如腹瀉、消化不良等，這是放療對腸道正常細胞的損傷引起的副作用。這種副作用的存在極大地影響了放療的進行和病人的康復。再者，目前沒有有效的藥物救治核泄漏事故中的腸型放射病。通過對照射后腸道細胞死亡形式及其機制的研究，尋找相應的救治措施，提高對正常組織的保護，以期提高放射治療的療效和救治腸型放射病。
　　

2、方法:小鼠接受15Gy全身照射后，觀察記錄小鼠的生存，繪制生存曲線;在照后指定的時間點處死小鼠，取出回腸，觀察結(jié)腸糞便形成、HE染色以及透射電鏡等形態(tài)學指標;免疫熒光法分析活性氧(ROS)的水平;ELISA法測定谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、過氧化氫(H2O2)以及超氧化物歧化酶(SOD)的水平;免疫印跡法分析Caspase-3，LC3B以及p53的磷酸化、乙酰化水平;免疫熒光法分析HMGB1;酶聯(lián)免疫法測定血清中的IL-6水平

3、。
　　 結(jié)果:照后小鼠回腸中活性氧明顯增加，而氧化指標(GSH，NO，H2O2，SOD)卻沒有明顯改變。通過形態(tài)學以及生化指標反映:在15Gy全身照射后的小鼠回腸中均顯示出凋亡、壞死以及自噬的特征。剪切的Caspase-3（凋亡標志物）的出現(xiàn)，LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ（自噬標志物）的轉(zhuǎn)換，血清IL-6的分泌以及HMGB1（壞死標志物）的表達。此外，在15Gy照后出現(xiàn)p53基因379位賴氨酸的乙?；约暗?、20、392位的絲氨酸