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1、從杭州水果批發(fā)市場、水果銷售點收集若干指狀青霉菌(Penicillium digitatum),對其中部分菌株進行抑霉唑的敏感性測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn),各菌株對抑霉唑敏感性存在差異,并存在抗性菌株.不同甾醇生物合成抑制劑的交互抗性研究發(fā)現(xiàn),抑霉唑抗性菌株對咪鮮胺、氟硅唑、三唑酮均表現(xiàn)正交互抗藥性.不同抗性菌株適合度研究結(jié)果表明,抗性菌株的致病力與敏感菌相比下降明顯,而抗性菌株的產(chǎn)孢能力和菌絲生長速率與敏感菌相比,略有下降.通過聚合酶鏈式反應(yīng)(P
2、CR)技術(shù)擴增獲得1個抑霉唑敏感和2個抑霉唑抗性的指狀青霉(P.digitatum)菌株的14-α-脫甲基酶(CYP51)基因全序列,并克隆到pGEM-Teasy Vector.序列分析表明,敏感菌株P(guān)d23CYP51基因全長2082bp,包含一個讀碼框的14-α-脫甲基酶基因的完整編碼區(qū)序列,3個典型真菌內(nèi)含子序列將該基因分成4個外顯子序列共同編碼一個516aa的蛋白質(zhì).抗性菌株P(guān)d01和Pd07的CYP51基因全長均為2586bp.
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