小麥NL26-3C殺配子染色體單體附加系的miRNA高通量測序研究.pdf

1、來自山羊草屬的某些染色體，在單體附加到不同基因型的普通小麥中時，具有完全或不完全的殺配子作用，在不完全殺配子作用下，可高頻率誘導各種類型的染色體結構變異，在小麥遺傳育種中發(fā)揮著重要的作用。但是殺配子染色體的分子作用機制至今還不清楚。
　　本研究創(chuàng)制NL26-3C殺配子染色體單體附加系材料，對NL26與NL26-3C單體附加系的花藥組織進行miRNA高通量測序，以TaqMan檢測技術驗證高通量測序的結果。篩出與殺配子作用相關的miR

2、NA，為揭示殺配子染色體的分子作用機制奠定基礎。主要研究結果如下：
　　1.以NL26為母本，NL26-3C殺配子染色體二體附加系為父本進行雜交，獲得F1代材料。以3C特異SCAR標記對F1材料進行鑒定，證明了其含有3C殺配子染色體。對F1代材料根尖進行染色體制片觀察，結果顯示，染色體數(shù)為43條，確定雜交獲得的F1代材料為NL26-3C殺配子染色體單體附加系。
　　2.對NL26和NL26-3C單體附加系花藥進行高通量測序，

3、獲得來自77個家族的133個已知miRNA，4個新miRNA。其中有9個miRNA在NL26-3C單體中表達顯著高于NL26，11個miRNA在NL26中表達顯著高于NL26-3C。對差異表達miRNA進行了靶基因功能預測。結果顯示，這些miRNA主要行使分子結合、酶的催化等功能，參與了細胞形成、細胞代謝等過程。
　　3.選取差異表達的miR9657b-3p，應用TaqMan技術檢測它在NL26和NL26-3C中的表達量。結果顯示