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1、蜜蜂幼蟲期營(yíng)養(yǎng)尤其是蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育至為關(guān)鍵。目前,蜜蜂蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)研究多集中在成蜂上,幼蟲期蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)需要研究較為薄弱。本研究利用人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲技術(shù),分別選用酶水解酪素和新鮮蜂王漿為蛋白源,設(shè)置不同蛋白水平的食物人工飼喂幼蟲,通過測(cè)定其生長(zhǎng)發(fā)育、生理生化及分子生物學(xué)指標(biāo)并加以分析,以探究蛋白源及水平對(duì)人工飼養(yǎng)條件下意大利蜜蜂發(fā)育的影響,并確定意大利蜜蜂幼蟲食物的適宜蛋白水平。
試驗(yàn)一為酶水解酪素及蛋白水平對(duì)意大利蜜蜂生
2、長(zhǎng)發(fā)育的影響。移取1d意大利蜜蜂幼蟲960只置于48孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,平均分為5組:對(duì)照組飼喂幼蟲基本食物,蛋白水平為8%;試驗(yàn)組分別飼喂添加酶水解酪素的幼蟲食物,使各組蛋白水平為9%、10%、11%和12%。采用人工飼養(yǎng)幼蟲技術(shù)飼喂幼蟲直至羽化出房,并對(duì)相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果表明:1)幼蟲食物蛋白水平對(duì)化蛹率和羽化率影響顯著(P<0.05),兩者均表現(xiàn)為蛋白水平9%組最高,8%~10%組顯著高于其他組(P<0.05);蛋白水平12%
3、組只能少數(shù)化蛹,但不能成功羽化。2)幼蟲期和蛹期體重受幼蟲食物蛋白水平影響顯著(P<0.05),且蛋白水平為9%~11%時(shí)體重顯著升高(P<0.05);而新蜂體重受蛋白水平影響不顯著(P>0.05)。3)幼蟲食物蛋白水平與蜂體蛋白以及血淋巴蛋白含量大致呈正相關(guān),但只有蛹期體蛋白含量顯著受蛋白水平的影響(P<0.05)。4)幼蟲食物蛋白水平顯著影響血淋巴中PO活性及CYP450含量(P<0.05),表現(xiàn)為蛋白水平8%~11%組PO活性顯著
4、高于12%組(P<0.05),蛋白水平8%~10%組CYP450含量顯著高于其他組(P<0.05)。5)幼蟲食物蛋白水平顯著影響蜂體SOD活性與T-AOC值(P<0.05),且隨蛋白水平升高,蜂體抗氧化能力呈現(xiàn)先升高后降低或一直降低的趨勢(shì)。6)幼蟲食物蛋白水平對(duì)蜂體各階段Dnmt3表達(dá)量影響不顯著(P>0.05);但蛋白水平對(duì)Mrjp1和Vg在某階段的表達(dá)量影響顯著(P<0.05),表現(xiàn)為蛋白水平為9%~10%時(shí),幼蟲期和新蜂期Mrjp
5、1表達(dá)量顯著升高(P<0.05),且幼蟲期和蛹期Vg表達(dá)量顯著升高(P<0.05)。
試驗(yàn)二為蜂王漿及蛋白水平對(duì)意大利蜜蜂生長(zhǎng)發(fā)育的影響。移取1d意大利蜜蜂幼蟲960只,平均分為5組:添加不同量的蜂王漿使各組蛋白水平為8%、9%、10%、11%和12%。試驗(yàn)方法與測(cè)定指標(biāo)同試驗(yàn)一。試驗(yàn)結(jié)果表明:1)幼蟲食物蛋白水平顯著影響化蛹率和羽化率(P<0.05),表現(xiàn)為蛋白水平8%~11%組有更高的化蛹率(P<0.05);8%~9%組羽
6、化率顯著提高(P<0.05),12%組同樣不能成功羽化。2)幼蟲食物蛋白水平對(duì)幼蟲期體重影響顯著(P<0.05),以9%組最高,但對(duì)蛹期和新蜂期體重沒有顯著影響(P>0.05)。3)幼蟲食物蛋白水平與蜜蜂各發(fā)育階段的體蛋白以及血淋巴蛋白含量呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。4)幼蟲食物蛋白水平對(duì)PO活性影響顯著(P<0.05),隨蛋白水平升高,PO活性逐漸降低;但食物蛋白水平對(duì)CYP450含量影響不顯著(P>0.05)。5)幼蟲食物蛋白水平
7、顯著影響蜂體SOD活性與T-AOC值(P<0.05),且在新蜂期,蜂體抗氧化能力隨蛋白水平升高而降低,但8%與9%組差異不顯著(P>0.05)。6)幼蟲食物蛋白水平對(duì)幼蟲期Dnmt3表達(dá)量影響顯著(P<0.05),但對(duì)蛹期和新蜂期影響不顯著(P>0.05);蛋白水平對(duì)幼蟲期和蛹期Mrjp1表達(dá)量影響顯著(P<0.05),表現(xiàn)為9%~10%組顯著高于其他組(P<0.05);蛋白水平對(duì)蜜蜂各發(fā)育時(shí)期Vg表達(dá)量均有顯著影響(P<0.05),且
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