松材線蟲病原真菌Esteya vermicola生物活性測定及其培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、松材線蟲（Bursaphelenchus xylophilus）是目前對中國林業(yè)威脅最大的有害生物，對松樹具有毀滅性的危害。自發(fā)現(xiàn)松材線蟲病以來，國內(nèi)外投入了巨大的人力、物力和財力來防治該病，迄今為止尚缺乏經(jīng)濟且行之有效的防控方法，仍有繼續(xù)蔓延的趨勢。目前對于松材線蟲病的防治，主要以化學(xué)防治為主，直接針對松材線蟲的防治難度較大，國內(nèi)外研究較少。本實驗室從韓國引進一種具有生防潛力的松材線蟲內(nèi)寄生真菌Esteyavermicola，前人研究

2、結(jié)果表明該真菌對松材線蟲具有很高的侵染活力。本文擬從侵染活力，營養(yǎng)特性和保存條件三個方面對該真菌進行試驗，旨在為今后利用該真菌進行松材線蟲生物防治提供理論依據(jù)。
　　 通過試驗證明了內(nèi)寄生真菌E.vermicola從產(chǎn)孢細胞上脫落的分生孢子對松材線蟲具有侵染活力，且營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基固體培養(yǎng)所得的真菌孢子對線蟲的侵染能力較強;不同菌株孢子對線蟲的侵染活力存在差異，菌株CBS115803的侵染活力最高，CBS100821菌株次之，C

3、NU120806菌株最低;在WA平板上采用浸漬法進行生測時，結(jié)果表明孢子更容易粘附到線蟲體表;孢子對松材線蟲的侵染活力隨著孢子濃度的降低而降低，所試濃度中，1×109個·ml-1的處理孢子對線蟲的粘附及致死效力最高。
　　 在液體和固體培養(yǎng)條件下，依次研究了碳、氮源種類和碳濃度及碳氮比對E.vermicola生長的影響。結(jié)果表明葡萄糖和酵母粉分別是最適宜液體和固體培養(yǎng)的碳、氮源。另外，液體培養(yǎng)條件下，當(dāng)碳濃度為12g·L-1，碳

4、氮比為5∶1和40∶1時，分別是菌絲生長和產(chǎn)孢的最優(yōu)組合;而固體培養(yǎng)條件下，當(dāng)碳濃度為8g·L-1，碳氮比為20∶1和10∶1時，分別是菌絲生長和產(chǎn)孢的最優(yōu)組合。以菌絲生物量和產(chǎn)孢量為指標(biāo)采用優(yōu)化培養(yǎng)基液體培養(yǎng)該真菌13d后得到生長曲線，5d后菌絲生物量達最大值，11d后產(chǎn)孢量達最大值，可為以后液體發(fā)酵進行批量生產(chǎn)時提供理論參考。
　　 通過從溫度（高溫干燥和低溫保存）、添加劑、空氣條件三方面初步研究了不同環(huán)境條件對E.verm