水體氨氮和亞硝酸氮對紅螯光殼螯蝦的毒性效應(yīng).pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：禱肖辰日期：2。諺寸，y7學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的

2、電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)?？梢韵驀矣嘘P(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學(xué)位論文屬于保密論文，密級：j疆壁?！籌密期限為』年。學(xué)位論文作者簽名：蕊前晨日期：工。f；j27指導(dǎo)教師簽名：考日期：上9廖3。0摘要上沒有明顯的相互作用。96h后，高氨氮濃度實(shí)驗(yàn)組中鰓Na訊ATP酶活性顯著

3、地降低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，氨氮致死毒性可能與氧化損傷以及滲透調(diào)節(jié)的功能障礙有關(guān)。3亞硝酸氮脅迫對紅螯光殼螯蝦鰓中抗氧化酶相關(guān)基因表達(dá)量的影響設(shè)置4個(gè)亞硝酸氮暴露濃度(05、1、15、2mgL叫N02’一N)和一個(gè)對照組進(jìn)行48h的亞硝酸氮脅迫，探討了亞硝酸氮毒性對紅螯光殼螫蝦幼蝦鰓中抗氧化相關(guān)酶的影響。經(jīng)過12h脅迫，亞硝酸氮各處理組鰓cMnSOD、mMnSOD的基因mRNA的相對表達(dá)量都顯著升高。exCu／ZnSOD的相對表達(dá)量在15和2

4、mgL—N02N處理組顯著升高。GPX的相對表達(dá)量在05和1mgL_處理組顯著升高。GST的相對表達(dá)量在12h脅迫后則沒有發(fā)生顯著的變化。24h脅迫后，05、1和I5mgL‘1N02N處理組的cMnSOD和exCu／ZnSOD的表達(dá)量顯著上升，mMnSOD的表達(dá)量在05和1mgL—N02N處理組顯著升高。GPX的表達(dá)量無濕著變化，GST表達(dá)量則隨著亞硝酸氮濃度的升高而升高。各抗氧化基因的表達(dá)量均有不同程度的升高，可能體現(xiàn)了“毒物興奮效應(yīng)

5、”，是機(jī)體對外界脅迫的主動(dòng)調(diào)節(jié)機(jī)制。48h脅迫后，高濃度組亞硝酸氮處理組各抗氧化基因的表達(dá)量都出現(xiàn)了不同程度的降低。mMnSOD的表達(dá)量在2mgL。1N02N處理組顯著低于對照組，其他基因在15和2mgL1N02一N處理組均顯著低于對照組。此時(shí)抗氧化酶基因的表達(dá)量在高濃度亞硝酸氮處理組都顯著降低，部分原因可能是由于亞硝酸氮脅迫對細(xì)胞造成的氧化損傷，使其基因表達(dá)量下降。另外由于長時(shí)間的亞硝酸氮脅迫能夠氧化血藍(lán)蛋白，造成機(jī)體處于相對缺氧的狀

6、態(tài)，無法充足的供給能量以轉(zhuǎn)錄這些基因應(yīng)對抗氧化脅迫。自由基的性質(zhì)極為活潑，過多的自由基將會(huì)攻擊各種生物大分子，引起DNA損傷、蛋白變性、脂質(zhì)過氧化等一系列氧化損傷，因此酶活水平的降低幅度可能將進(jìn)一步大于其基因表達(dá)水平。4氨氮脅迫及其毒后恢復(fù)對紅螯光殼螯蝦相關(guān)免疫和代謝指標(biāo)的影響應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，結(jié)合生物酶和代謝的產(chǎn)物測定，研究了氨氮脅迫對紅螯光殼螯蝦免疫系統(tǒng)的毒性影響及其毒后恢復(fù)情況。實(shí)驗(yàn)首先進(jìn)行3天的氨氮脅迫，取樣后剩余蝦移