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文檔簡介
1、<p> 發(fā) 酵 工 程 與 設 備 課 程 設 計</p><p> 題 目 醋酸的發(fā)酵生產(chǎn) </p><p> 專業(yè)年級 0*生物工程 </p><p> 學生姓名 *** </p><p> 學 號 20***10**00**
2、 </p><p> 指導老師 **** </p><p> 2008 年 6 月 23 日</p><p><b> 目錄</b></p><p> 1前言………………………………………………………………………………………….3</p><p> 1.
3、1醋酸簡介………………………………………………………………………………….3</p><p> 1.2全球醋酸的生產(chǎn)狀況…………………………………………………………………….3</p><p> 1.3國外生產(chǎn)研究現(xiàn)狀……………………………………………………………………….3</p><p> 1.4國內(nèi)醋酸的生產(chǎn)狀況如下…………………………………………………
4、…………….3</p><p> 1.5國內(nèi)生產(chǎn)研究現(xiàn)狀……………………………………………………………………….3</p><p> 1.6主導生產(chǎn)方法…………………………………………………………………………….4</p><p> 1.7食用醋酸生產(chǎn)研究現(xiàn)…………………………………………………………………….4</p><p> 1
5、.8生產(chǎn)技術的革新與改造………………………………………………………………….4</p><p> 1.8.1純種固態(tài)食醋生產(chǎn)技術的建立……………………………………………………….4</p><p> 1.8.2純種液態(tài)食醋生產(chǎn)技術的建立……………………………………………………….4</p><p> 1.8.3傳統(tǒng)釀造食醋的技術改造……………………………………
6、……………………….4</p><p> 1.9我國目標………………………………………………………………………………….4</p><p> 2發(fā)酵機制…………………………………………………………………………………….4</p><p> 2.1淀粉水解………………………………………………………………………………….4</p><p>
7、 2.2酒精發(fā)酵………………………………………………………………………………….4</p><p> 2.2.1精發(fā)酵微生物………………………………………………………………………….4</p><p> 2.2.2 酒精發(fā)酵中的物質(zhì)變化………………………………………………………………4</p><p> 2.3 醋酸發(fā)酵…………………………………………………
8、………………………………5</p><p> 2.3.1 醋酸發(fā)酵微生物………………………………………………………………………5</p><p> 2.3.2 醋酸發(fā)酵中的物質(zhì)變化…………………………………………………………….5</p><p> 2.4 醋酸的提取………………………………………………………………………………5</p><
9、p> 3 發(fā)酵工藝及特點……………………………………………………………………………5</p><p> 3.1 原料………………………………………………………………………………………5</p><p> 3.2 調(diào)漿………………………………………………………………………………………6</p><p> 3.3 液化和糖化…………………………………………
10、……………………………………6</p><p> 3.4 酒精發(fā)酵…………………………………………………………………………………6</p><p> 3.4.1 前發(fā)酵期………………………………………………………………………………6</p><p> 3.4.2 主發(fā)酵期………………………………………………………………………………7</p>&l
11、t;p> 3.4.3后發(fā)酵期……………………………………………………………………………….7</p><p> 3.5 醋酸發(fā)酵…………………………………………………………………………………7</p><p> 3.5.1淋醋發(fā)酵工藝…………………………………………………………………………7</p><p> 3.5.2 深層發(fā)酵工藝………………………
12、…………………………………………………7</p><p> 3.5.3固定化細胞發(fā)酵法……………………………………………………………………8</p><p> 3.5.5 醋酸提取………………………………………………………………………………8菌種的制備及種子的擴大培養(yǎng)………………………………………………………………9</p><p> 4.1實驗室種子制備:…
13、……………………………………………………………………9</p><p> 4.1.1選育釀酒酵母株的方法………………………………………………………………9</p><p> 4.1.2 醋酸菌篩選流程………………………………………………………………………9</p><p> 4.2 擴大培養(yǎng)……………………………………………………………………………….10&l
14、t;/p><p> 4.2.1酒母的制備……………………………………………………………………………10</p><p> 4.2.2醋酸菌擴大培養(yǎng)………………………………………………………………………10</p><p> 5.培養(yǎng)基的組成及制備…………………………………………………………………….10</p><p> 5.1酒精發(fā)酵培
15、養(yǎng)基組成……………………………………………………………………10</p><p> 5.2醋酸發(fā)酵培養(yǎng)基…………………………………………………………………………10</p><p> 5.3發(fā)酵罐滅菌………………………………………………………………………………10</p><p> 5.4滅菌流程………………………………………………………………………………..
16、11</p><p> 6無菌空氣制備系統(tǒng)………………………………………………………………………..11</p><p> 6.1發(fā)酵生產(chǎn)中制備無菌空氣過程………………………………………………………..11</p><p> 6.2特點……………………………………………………………………………………..12</p><p> 6.3設
17、備選擇…………………………………………………………………………………12</p><p> 7工藝計算…………………………………………………………………………………..12</p><p> 7.1.說明…………………………………………………………………………………….12</p><p> 7.2 計算…………………………………………………………………………
18、…………. 12</p><p> 8.三廢處理………………………………………………………………………………….15</p><p> 8.1廢氣……………………………………………………………………………………..15</p><p> 8.2廢水……………………………………………………………………………………..15</p><p>
19、 8.3廢渣………………………………………………………………………………………15</p><p> 發(fā)酵工程與設備課程設計正文</p><p><b> 1 前言</b></p><p> 1.1 醋酸簡介:醋酸(Acetic Acid)是食用醋的主要化學成分,是無色透明液體(低于16.7°C時為白色晶體),有刺激性的酸味,
20、它的蒸汽對粘膜,尤其是對眼睛的粘膜有刺激作用。濃醋酸能引起皮膚的灼傷。醋酸與水、醇、苯、甘油、脂肪油等有機液體能互溶。醋酸是一種重要的有機化工產(chǎn)品, 主要用于醋酸乙烯、對苯二甲酸、醋酸纖維、醋酸酯等產(chǎn)品的生產(chǎn), 是合成纖維、膠粘劑、醫(yī)藥、染料和農(nóng)藥的重要原料。醋酸還是優(yōu)良的有機溶劑, 在塑料、橡膠、印刷等行業(yè)有著十分廣泛的用途[1] 。食醋是人們生活中不可或缺的酸性調(diào)味品,其兼有防止腐敗、增進食欲、保健防病、緩解疲勞等功能。近來醋在色拉
21、調(diào)料、調(diào)味番茄醬以及其他調(diào)味醬領域里也扮演著非常重要的角色[2]。</p><p> 食用醋酸的生產(chǎn)技術主要是醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生。對于生產(chǎn)純醋酸來說,目前化學合成法的成本較低,所以發(fā)酵法并不廣泛在工業(yè)上生產(chǎn)純醋酸。</p><p> 工業(yè)化的醋酸生產(chǎn)技術主要有: 甲醇羰基化法、乙醛氧化法、乙烯直接氧化法和輕油(丁烷或石腦油)氧化法。</p><p> 1.2 全球
22、醋酸的生產(chǎn)狀況如下:2004 年, 全球醋酸生產(chǎn)能力約為987 萬噸/年,其中各地區(qū)的生產(chǎn)能力分別為: 北美347 萬噸、歐洲142 萬噸、亞洲435 萬噸; 分別占世界總生產(chǎn)能力的35%、14%和44%。近年來, 亞洲地區(qū)產(chǎn)能增加較快,年均增長率約為7.7%, 高于世界2.9%的年均增長率。</p><p> 1.3 國外生產(chǎn)研究現(xiàn)狀:塞拉尼斯公司是世界兩大醋酸生產(chǎn)商之一, 總產(chǎn)能為242.5 萬噸/年。其裝
23、置主要在美國和新加坡,在美國甲醇羰基合成法裝置的能力已達到120 萬噸/年, 是世界上最大的生產(chǎn)裝置, 在新加坡羰基法裝置的能力為50 萬噸/年, 而在其他地區(qū)的乙醛氧化生產(chǎn)醋酸的裝置相繼關閉?,F(xiàn)有裝置主要采用甲醇羰基合成法和丁烷液相氧化法。目前, 該公司正在南京獨資建設一套60 萬噸/年的生產(chǎn)裝置, 2007 年建成投產(chǎn)。BP 也是世界主要的醋酸生產(chǎn)商, 在全球4 個地區(qū)擁有醋酸生產(chǎn)裝置, 總能力為177 萬噸/年, 占全球總產(chǎn)能的1
24、7.9%。其在英國的羰基合成法裝置能力為50 萬噸/年; 在韓國是BP 和三星的合資公司,現(xiàn)裝置能力已達42 萬噸/年, BP 持股51%; 在馬來西亞是和Petronas 公司的合資企業(yè), 裝置能力為40萬噸/年; 與中石化四川維尼綸廠合資建設的醋酸裝置產(chǎn)能現(xiàn)已擴大為35 萬噸/年。世界兩大醋酸生產(chǎn)商塞拉尼斯和BP 控制了全球的醋酸生產(chǎn),總產(chǎn)能已達到419.5 萬噸/年, 占全球總產(chǎn)能的40%以上。</p><p&
25、gt; 1.4 國內(nèi)醋酸的生產(chǎn)狀況如下:目前, 我國共有20 多套醋酸生產(chǎn)裝置( 一些乙醇法的生產(chǎn)企業(yè)多數(shù)處于停產(chǎn), 只有幾家還在生產(chǎn),產(chǎn)量很低) , 至2005 年年底, 我國的總生產(chǎn)能力達到了176.5 萬噸/年, 2005 年全年產(chǎn)量為140 萬噸, 比去年增長21.5%。</p><p> 1.5 國內(nèi)生產(chǎn)研究現(xiàn)狀:我國現(xiàn)有甲醇羰基合成法醋酸生產(chǎn)企業(yè)4 家,生產(chǎn)能力為100 萬噸/年, 占總產(chǎn)能的63
26、%; 乙烯法生產(chǎn)企業(yè)有4 家, 生產(chǎn)能力為44.5 萬噸/年, 占總產(chǎn)能的28.4%;其余為乙醇法。目前, 我國甲醇羰基合成法醋酸生產(chǎn)已占據(jù)了主導地位, 并且產(chǎn)能和產(chǎn)量都有了較大幅度的增長, 裝置開工率接近100%; 而隨著國際油價的不斷上升, 占主導地位的乙烯法產(chǎn)量有所下降, 開工率約為74%。我國甲醇羰基化法的最大生產(chǎn)企業(yè)是江蘇索普(集團)公司, 有兩套生產(chǎn)裝置, 總產(chǎn)能約為40 萬噸/年, 2005 年產(chǎn)量為40.3 萬噸。四川揚
27、子江乙?;び邢薰臼俏覈诙蠹状剪驶铣煞ù姿嵘a(chǎn)企業(yè), 1998 年一期工程完成, 當時產(chǎn)能為15 萬噸/年;二期工程于2002 年完成, 產(chǎn)能擴大至23 萬噸/年;三期工程于2005 年7 月投料試車, 產(chǎn)能已達到35萬噸/年, 2005 年產(chǎn)量為25 萬噸。上海吳涇化工公司醋酸生產(chǎn)裝置通過技術攻關, 現(xiàn)有的生產(chǎn)能力已從10 萬噸/年擴大為現(xiàn)在的25 萬噸/年, 2005 年產(chǎn)量為20 萬噸。山東兗礦國泰化工公司是由兗礦集團和香
28、港彩福按</p><p> 1.6 主導生產(chǎn)方法:目前, 全球醋酸生產(chǎn)以甲醇羰基合成法占主導地位, 生產(chǎn)能力已達到617.5 萬噸/年, 約占總產(chǎn)能的63%[3]。</p><p> 1.7 食用醋酸生產(chǎn)研究現(xiàn):目前傳統(tǒng)醋工藝、純種固體制醋工藝和純種液態(tài)制醋工藝已經(jīng)形成3大工藝路線并存。</p><p> 1.8 生產(chǎn)技術的革新與改造</p>&
29、lt;p> 1.8.1 純種固態(tài)食醋生產(chǎn)技術的建立</p><p> 從20 世紀50年底開始,我國就開始了純種固態(tài)法生產(chǎn)食醋的嘗試。20 世紀60 年代,上海創(chuàng)造了酶法液化自然通風回流的固體發(fā)酵工藝, 分別使用了純種培養(yǎng)的曲霉菌、酵母菌、醋酸菌作為發(fā)酵劑進行液化、糖化、酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵。20 世紀70 年代初,山西長治試驗生料制醋獲得成功,主輔料全部采用生料。這是一條全新的純種固態(tài)制醋工藝,主要的技
30、術難題是防止雜菌污染與提高原料利用率。</p><p> 1.8.2 純種液態(tài)食醋生產(chǎn)技術的建立</p><p> 純種液態(tài)發(fā)酵制醋是借鑒抗生素、氨基酸等其他發(fā)酵工業(yè)的經(jīng)驗,應用現(xiàn)代發(fā)酵工程、細胞工程和酶工程技術建立起來的一類先進的新型制醋生產(chǎn)技術,包括自吸式發(fā)酵罐液態(tài)制醋、固定化細胞發(fā)酵制醋和酶制劑發(fā)酵制醋3種工藝。</p><p> 1.8.3 傳統(tǒng)釀造食
31、醋的技術改造</p><p> 我國傳統(tǒng)釀醋技術在世界上獨具一格,在長期的生產(chǎn)實踐中已形成了固定的工藝模式和操作習慣。然而醋業(yè)界的有識之士和科研工作者追求傳統(tǒng)釀醋技術進步的活動從來沒有停止過,不斷探索傳統(tǒng)釀醋微生物的活動規(guī)律,優(yōu)化工藝操作條件,改進生產(chǎn)設備與擴大生產(chǎn)規(guī)模,使傳統(tǒng)食醋釀造技術向現(xiàn)代方向逐步邁進。</p><p> 1.9 我國目標:新中國成立以后, 特別是改革開發(fā)以后的2
32、0 多年來,我國制醋業(yè)的發(fā)展環(huán)境有了很大變化。在政府領導、科研人員和醋業(yè)工作者的共同努力下,開展了釀醋微生物、制醋生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)設備的多學科研究。選育了優(yōu)良的微生物菌種, 建立了純種固態(tài)食醋生產(chǎn)技術和純種液態(tài)食醋生產(chǎn)技術,改進了質(zhì)檢方法, 優(yōu)化了制醋設備,極大地提高了我國食醋的生產(chǎn)技術水平,使我國食醋產(chǎn)量和人均消費水平得到明顯提高,制醋工業(yè)朝著科學化、機械化與大型化的方向發(fā)展的格局[4]。</p><p><
33、;b> 2 發(fā)酵機制</b></p><p> 醋酸的生產(chǎn)分為3個過程:淀粉水解成糖,糖發(fā)酵成酒精,酒精氧化成醋酸。這3個發(fā)酵過程都是依靠不同的微生物分泌的酶作用下進行的,所以發(fā)酵過程就是創(chuàng)造有關微生物發(fā)育與酶作用有利條件的過程。</p><p><b> 2.1 淀粉水解</b></p><p> 淀粉是碳水化合物中
34、重要多糖之一,為植物通過光合作用合成的天然高分子化合物。但它不能被酵母利用,必須首先把淀粉轉(zhuǎn)化為可發(fā)酵的糖類,然后才能被酵母將糖發(fā)酵為酒精。淀粉轉(zhuǎn)化為可發(fā)酵性糖類的過程,稱之為淀粉水解。常規(guī)淀粉水解過程為: ( C6H1 0O5 ) n + nH2O → X ( C6H1 0O5 ) 10 - 20 →nC6H1 2O6</p><p><b> 2.2 酒精發(fā)酵</b></p>
35、;<p> 2.2.1 精發(fā)酵微生物</p><p> 酒精發(fā)酵所用微生物為酵母,其主要特點有①.呈橢圓形,大小約4×5μm; ②.生長的適宜溫度28~34℃, 35℃以上活力減退, 60℃5分鐘死亡,5℃可緩慢生長; ③.耐酸,適合pH值為4~6, pH值低于3. 5時生長受到抑制; ④.在通氣條件下細胞繁殖,不通氣條件下酒精發(fā)酵。</p><p> 2.2
36、.2 酒精發(fā)酵中的物質(zhì)變化</p><p> 酒精發(fā)酵中的物質(zhì)變化具體過程為:葡萄糖在己糖激酶的催化下,由ATP供給磷酸基轉(zhuǎn)化為6 - 磷酸葡萄糖; 6 - 磷酸葡萄糖在磷酸己糖異構酶的催化下轉(zhuǎn)化為6 - 磷酸果糖; 6 - 磷酸果糖在磷酸果糖激酶的催化下,由ATP供給磷酸基,進一步磷酸化,生成1, 6 - 二磷酸果糖; 1, 6 - 二磷</p><p> 酸果糖在醛縮酶的催化下,分
37、裂為磷酸二羥丙酮和3 - 磷酸甘油醛;磷酸二羥丙酮和3 - 磷酸甘油醛在磷酸丙糖異構酶的催化下相互轉(zhuǎn)化; 3 - 磷酸甘油醛在3 - 磷酸甘油醛脫氫酶的催化下,并經(jīng)磷化,生成1, 3 - 二磷酸甘油酸; 1, 3 - 二磷酸甘油酸在磷酸甘油酸激酶的催化下,變?yōu)? - 磷酸甘油酸; 3 - 磷酸甘油酸在磷酸甘油酸變位酶的催化下,轉(zhuǎn)變?yōu)? - 磷酸甘油酸; 2 - 磷酸甘油酸在烯醇化酶的催化脫水,生成為2 - 磷酸烯醇式丙酮酸; 2 - 磷
38、酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶的催化下,失去高能磷酸鍵,生成烯醇式丙酮酸;由于烯醇式丙酮酸極不穩(wěn)定,變?yōu)楸?丙酮酸在脫羧酶的催化下脫羧,生成乙醛;乙醛在乙醇脫氫酶及輔酶(NADH2)的催化下,還原成乙醇。在酒精發(fā)酵中,其主要產(chǎn)物是乙醇和CO2 ,但同時也產(chǎn)生許多發(fā)酵副產(chǎn)品,主要有醇、醛、酸和酯四大類化學物質(zhì),這也是醋中風味物質(zhì)的前體物質(zhì)[5]。</p><p><b> 2.3 醋酸發(fā)酵</b&
39、gt;</p><p> 2.3.1 醋酸發(fā)酵微生物</p><p> 醋酸發(fā)酵所用微生物為醋酸菌,其主要特點有①呈短桿狀,大小約0. 5 ×1. 5μm; ②為好氣性菌; ③繁殖適宜溫度在30℃左右,最佳酒精氧化溫度40~45℃; ④在60℃時10 min死亡; ⑤能氧化酒精為醋酸,適宜酒精度為3% ~6%; ⑥能被自己所生成的醋酸殺滅; ⑦能氧化醋酸為CO2和H2O。&l
40、t;/p><p> 2.3.2 醋酸發(fā)酵中的物質(zhì)變化</p><p> 醋酸發(fā)酵中的物質(zhì)變化具體過程為:乙醇在乙醇脫氫酶的催化下,氧化成乙醛,通過吸水形成水化乙醛,再由乙醛脫氫酶氧化成乙酸。反應步驟為:C2H5OH→CH3CHO→CH3COOH.由于醋酸菌含有乙酰輔酶A合成酶,它能氧化乙酸為CO2和H2O,所以在醋酸發(fā)酵后期,如發(fā)現(xiàn)乙酸不再上升時,酒度耗盡時,即為成熟期。</p>
41、;<p><b> 2.4 醋酸的提取</b></p><p> 原理為水與醋酸的沸點相差較大。</p><p> 人們所研究過的醋酸提取方法很多,但可以用于工業(yè)上的只有少數(shù)幾種。①.分餾(精餾)。②.恒沸脫水蒸餾。 ③.溶劑(低沸點或高沸點)萃取。④.上述方法聯(lián)合使用。⑤.萃取蒸餾和活性炭吸附等[6]。</p><p>
42、 3 發(fā)酵工藝及特點[7]</p><p> 淋醋工藝是德國學者舒萊巴赫首先推舉出來的,由于它比傳統(tǒng)的固體制醋法(需40-60天)要快的多(只需5天),所以又稱為速釀法。一般工藝流程為:</p><p> ↓ ↓ ↓</p><p> 大米→調(diào)漿→蒸煮→液化與糖化→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵→醋酸提取</p><p
43、><b> ↑ </b></p><p><b> 生產(chǎn)工藝</b></p><p><b> 3.1 原料</b></p><p> 主要原料有大米、高粱、玉米粉(麩皮、米糠、紅薯干等粗糧均可),麩皮,谷殼(小米殼也可),食鹽,淀粉酶、糖化酶,醋用發(fā)酵劑,水。</p>&
44、lt;p><b> 3.2 調(diào)漿</b></p><p> 主要機器:磨漿機、調(diào)漿桶、調(diào)漿罐</p><p> 先將碎米浸泡,使米粒充分吸水膨脹。按米:水=1:1.5的比例送入磨漿機,磨成70目以上細度的粉漿(濃度為18~20°Be)。粉漿泵送至調(diào)漿桶后,加入Na2CO3調(diào)至pH6.2~6.4,再加入碎米重量0.2%的CaCl2,然后按每克碎米1
45、30單位加入細菌α-淀粉酶。在充分攪拌情況下,將粉漿緩緩連續(xù)放入液化桶中。</p><p><b> 3.3 液化和糖化</b></p><p> 主要設備:液化鍋、糖化罐</p><p> 先在液化鍋內(nèi)放定量的水,一般要求淹沒加熱管。將水升溫至90℃,開動攪拌,流入粉漿,掌握品溫在85℃~90℃。粉漿全部進入鍋內(nèi)后,維持10~15min
46、,用碘液檢查不顯藍色表示液化已經(jīng)完成。升溫至100℃,泵入糖化鍋。冷卻至65℃以下時加入麩曲或真菌糖化酶,維持在60℃左右糖化3小時。</p><p><b> 糖化罐如圖1所示</b></p><p><b> 3.4 酒精發(fā)酵</b></p><p> 主要設備:密閉式酒精發(fā)酵罐</p><p
47、> 淀粉經(jīng)過糖化后可得到葡萄糖,將糖化30min后的醪液打入發(fā)酵罐,再把酵母罐內(nèi)培養(yǎng)好的酵母接入。酵母菌將葡萄糖經(jīng)過細胞內(nèi)一系列酶的作用,生成酒精和CO2。在發(fā)酵罐里酒精發(fā)酵分3個時期:前發(fā)酵期,主發(fā)酵期,后發(fā)酵期。</p><p> 3.4.1 前發(fā)酵期</p><p> 在酒母與糖化醪打入發(fā)酵罐后,這時醪液中的酵母細胞數(shù)還不多,由于醪液營養(yǎng)豐富,并有少量的溶解氧,所以酵母細
48、胞能夠得以迅速繁殖,但此時發(fā)酵作用還不明顯,酒精產(chǎn)量不高,因此發(fā)酵醪表面比較平靜,糖份消耗少。前發(fā)酵期一般10h左右,應及時通氣。</p><p> 3.4.2 主發(fā)酵期</p><p> 8~10 h后,酵母已大量形成,并達到一定濃度,酵母菌基本停止繁殖,主要進行酒精發(fā)酵,醪液中酒精成分逐漸增加, CO2 隨之逸出,有較強的CO2 泡沫響聲,溫度也隨之很快上升,這時最好將發(fā)酵醪的溫度
49、控制在32~34℃之間,主發(fā)酵期一般為12 h左右。</p><p><b> 3.4.3后發(fā)酵期</b></p><p> 后發(fā)酵期醪液中的糖份大部分已被酵母菌消耗掉,發(fā)酵作用也十分緩慢,這一階段發(fā)酵,發(fā)酵醪中酒精和二氧化碳產(chǎn)生得少,所以產(chǎn)生的熱量也不多,發(fā)酵醪的溫度逐漸下降,溫度應控制在30~32℃,如果醪液溫度太低,發(fā)酵時間就會延長,這樣會影響出酒率,這一時
50、期約需40 h左右完成。酒精發(fā)酵罐如圖2所示</p><p><b> 3.5 醋酸發(fā)酵</b></p><p> 3.5.1淋醋發(fā)酵工藝</p><p><b> 主要設備:速釀塔</b></p><p> 國內(nèi)用作淋醋發(fā)酵的設備稱為速釀塔,速釀塔高2~5米,直徑1~1.3米,圓桶形,塔頂
51、封蓋,有排氣孔,內(nèi)有假底,塔內(nèi)置一層處理過的填充料一樺木刨花、蘆葦秤或玉米芯(已經(jīng)洗凈)等——上鋪厚約15厘米的粗谷糠),塔頂部裝有回轉(zhuǎn)噴淋管,聚液槽接有不銹鋼離心泵使醋酸循環(huán)淋澆。塔頂封閉,只留排氣管,管口包扎紗布以調(diào)節(jié)空氣的進入量。塔的上、中、下部皆插有溫度計。</p><p> 將酒液一次加入醋塔內(nèi),再接入醋酸菌液10%,然后定時回澆和以定溫循環(huán)回淋結(jié)合,約每隔90分鐘回淋一次。品溫控制35~42℃之間。
52、如果發(fā)現(xiàn)品溫過高或過低,應靈活決定回澆次數(shù)和控制空氣進入?;貪矔r要隨時注意噴淋管是否運轉(zhuǎn)正常,防止局部位置上填充物溫度過高,造成發(fā)酵異常。經(jīng)50多小時,測定淋出液酸度不再上升,酒精耗盡時,即為成熟期。</p><p> 醋塔法制醋酸特點: ①.塔內(nèi)填充料能連續(xù)使用,可以節(jié)約麩皮等原料,并不需要出渣,減輕了勞動強度;②.原料出品率較高; ③.填充料來源廣泛; ④.口味比較單調(diào)。</p><p&
53、gt; 國外淋醋工藝采用的典型設備是弗林斯發(fā)生器(Flings generator)</p><p> 在弗林斯發(fā)生器中,載體層的溫度自控問題已在可能的程度上得到了解決。其操作過程如下:酒醪有泵從發(fā)酵罐的聚液槽連續(xù)通過換熱器泵送到進料罐中,它可以由此通過分布盤和櫸木刨花層間接回到聚液槽,或者通過溢流管直接回到聚液槽,刨花層中具有3只接觸式溫度計,它能控制進料罐的閥門進行循環(huán)液的調(diào)節(jié)。酒醪中的1只接觸式溫度計通
54、過電磁閥可以控制進入換熱器的冷卻水流量。以這種方式,在很高的發(fā)酵速率下,酒醪品溫也可以控制在26℃~28℃,而刨花層中溫度計觸點處的溫度可以控制在28℃~33℃之間??諝馔ㄟ^載體層的底部吹入,通過排氣管放出。</p><p> 當殘余乙醇降到0.3%(v/v)時,將聚液槽中的醋液大部分放出,然后在幾天之內(nèi)分2~3次補足。在每一循環(huán)的開始,發(fā)酵速率可能明顯降低,這是由于乙醇和醋酸濃度的巨大變化導致載體層上部細菌大
55、量死亡造成的。</p><p> 一旦新添加的酒醪與吸附在刨花上的醋液混合之后,就形成了發(fā)酵的適宜條件,即8%醋酸和4%乙醇。乙醇向醋酸轉(zhuǎn)化率取決于刨花層的使用時間,一般在85~90%之間。高峰發(fā)酵期的氧利用率約為50%。發(fā)酵的長短與刨花層與聚液槽的體積比有關,一般為4~10天。用櫸木刨花做載體時,這種設備的生產(chǎn)能力約為每m3載體每天產(chǎn)醋5L。如果產(chǎn)醋質(zhì)量下降,則可能應為刨花層上細菌性質(zhì)已發(fā)生變化,例如形成粘性
56、結(jié)塊物等。</p><p> 3.5.2 深層發(fā)酵工藝</p><p> 主要設備:自吸式發(fā)酵罐、通氣裝置、消泡器、酒精儀、</p><p><b> 發(fā)酵規(guī)程:</b></p><p> 國內(nèi)食用醋酸深層發(fā)酵的規(guī)程為:酒醪放入發(fā)酵罐中之后,接入培養(yǎng)12~14h的醋酸種子培養(yǎng)物20%,維持溫度35~37℃,通風量
57、前期為0.13vvm,中期為0.17vvm,后期也為0.13vvm,罐壓維持在30kPa,在攪拌下發(fā)酵。發(fā)酵過程中,溫度每小時測定一次;酸度前期4h測一次,中期2h測一次,后期4h測一次,若酒精降到測不出,表明發(fā)酵已經(jīng)結(jié)束。整個過程約需40~50h。</p><p> 深層發(fā)酵可以是間歇進行的,也可以是半連續(xù)或連續(xù)進行的。因為連續(xù)和半連續(xù)發(fā)酵可以免去培養(yǎng)種子的操作,所以多被采用。</p><
58、p> 連續(xù)發(fā)酵的操作規(guī)程是,將酒精儀置定在乙醇濃度2%(v/v),即維持罐內(nèi)乙醇濃度2%。這由酒精儀控制進料閥,從而控制流加速率來實現(xiàn)。進料的乙醇濃度約為12%,罐內(nèi)溫度維持在31~33℃,開動通氣溢流管連續(xù)流出。</p><p> 3.5.3固定化細胞發(fā)酵法</p><p> 淋醋發(fā)酵是固定化細胞發(fā)酵的典型之例,淋醋發(fā)酵具有傳質(zhì),傳熱不均勻性,而這主要是由于載體不均勻性造成的
59、?,F(xiàn)代細胞固定化技術研究主要是載體的研究。根據(jù)固定后的細胞在發(fā)酵中是否隨發(fā)酵液流動可以把固定細胞發(fā)酵法分成兩大類:固膜式發(fā)酵和流化式發(fā)酵。相應的固定方法成為固膜固定法和流化固定法。前者是細胞在載體上形成了生物膜,不隨發(fā)酵液流動,如纖維、陶瓷、和前述的刨花用作載體的固定方法;而流化固定只是將細胞固定在載體內(nèi)或(和)表面上,或不用載體的自聚集固定,在發(fā)酵中載體帶著菌體在發(fā)酵液內(nèi)流動,如卡拉膠、海藻酸鈉等固定劑制成的凝膠珠則屬于這種類型。&l
60、t;/p><p> 3.5.4熱醋酸梭菌發(fā)酵法</p><p> 熱醋酸梭菌發(fā)酵具有轉(zhuǎn)化率高,耐高溫,發(fā)酵有糖到醋酸一步完成,不需通氧,可以利用戊糖等優(yōu)點,但這種方法發(fā)酵時需要加中和劑,因此只適用與生產(chǎn)醋酸鹽。</p><p> 3.5.5 醋酸提取</p><p> 首先將發(fā)酵液過濾:可采用板框式壓濾機或自動板框式壓濾機</p&g
61、t;<p> 多塊濾板和濾框交替排列而組成,板框之間隔有濾布,一端為固定端、一端為活動端,用壓緊裝置自活動端向固定端將板框壓緊,進出口裝在固定端上。</p><p><b> 如圖:</b></p><p> 原理為水與醋酸的沸點相差較大。</p><p> 人們所研究過的醋酸提取方法很多,但可以用于工業(yè)上的只有少數(shù)幾種。
62、①.分餾(精餾)。②.恒沸脫水蒸餾。③.溶劑(低沸點或高沸點)萃取。④.上述方法聯(lián)合使用。⑤.萃取蒸餾和活性炭吸附等。</p><p><b> 蒸餾塔如圖[8]:</b></p><p> 發(fā)酵過程中參數(shù)的檢測:</p><p> pH; 進出氣體中的氧;二氧化碳;溶解氧; 還原糖; 細胞濃度等。</p><p>
63、; 4菌種的制備及種子的擴大培養(yǎng)</p><p> 4.1實驗室種子制備:</p><p> 從未滅菌的酒精中分離酵母菌;從未滅菌的食醋中分離得到醋酸菌</p><p> 4.1.1選育釀酒酵母株的方法[9]:</p><p> ?、?自然選育:從自然界直接分離篩選高產(chǎn)酒精酵母是育種工作中最經(jīng)濟實用的方法</p><
64、;p> ?、?誘變育種:是用物理或化學的誘變劑使誘變對象內(nèi)的遺傳物質(zhì)(DNA)的分子結(jié)構發(fā)生改變,引起性狀變異并通過篩選獲得符合要求的變異菌株的一種育種方法。其中物理方法有:射線(紫外線、X光線、Y射線,中子線),激光微束,離子束,微波,超聲波,熱力等?;瘜W誘變常用方法有:浸漬法、涂抹法、滴液法、注射法、施入法和熏蒸法。</p><p> ③ .雜交育種:是指在不同種群、不同基因型個體間進行雜交,并在其雜
65、種后代中通過選擇而育成純品種的方法。</p><p> 制備酒母的參考配方: </p><p> 紅苕干粉或玉米料若干,加水比1∶4.5—5,硫酸銨0.1—0.16%(使用玉米可不添加),用H2SO4調(diào)整pH值至4.0—4.5。[8]</p><p> ?、?行篩選分離純化。</p><p> 4.1.2 醋酸菌篩選流程[10]:<
66、;/p><p> 液醋→增殖培養(yǎng)→稀釋分離→選取單菌落→試管斜面培養(yǎng)→液體試管培養(yǎng)→液體三角瓶培養(yǎng)→測酸→確定菌株→純化。</p><p> 試管斜面菌種保藏培養(yǎng)基:酵母膏1% 、葡萄糖1% 、CaCO3 0.5% 、酒精3。(v/v)、瓊脂2%;</p><p> CaCO3平板分離培養(yǎng)基:酵母膏1%、葡萄糖1% 、CaCO3,2% 、酒精3。(v/v)、瓊脂
67、2% ,pH 6.5。</p><p> 液體三角瓶培養(yǎng)基:酵母膏1%、葡萄糖1%、酒精4。(v/v),pH5.5。</p><p><b> ?、?分離篩選</b></p><p> 初篩(透明圈法) :取不同發(fā)酵時間液態(tài)醋20mL ,加入50mL 增殖培養(yǎng)基,30 ℃增殖培養(yǎng)3~4 d。稀釋至4~7倍,各取0.2 mL ,涂到平板分離培
68、養(yǎng)基,30 ℃培養(yǎng)3 d ,待長出菌落后,挑菌落較小、透明圈較大、邊緣整齊的單菌落移植試管培養(yǎng)。復篩:取經(jīng)初篩培養(yǎng)成的斜面菌落,接入液體試管(裝液量10mL 、酒精體積分數(shù)3 %) , 30 ℃培養(yǎng)24 h 后,接入500mL液體三角瓶(裝液量40mL) ,接種量為1 支試管接1 只三角瓶。最后酒精體積分數(shù)為6% ,30℃靜止培養(yǎng),每日測定酸度,選出產(chǎn)酸快、酒精轉(zhuǎn)化率高的菌株并做醋酸定性試驗。</p><p>
69、 ②.純化:確定產(chǎn)酸快、酒精轉(zhuǎn)化率高的較優(yōu)菌株,反復純化獲得純種。純化方法同分離方法。 </p><p><b> ③.種保藏</b></p><p> 生產(chǎn)菌種可傳代保藏在4℃。如果需保藏較長時間,可用凍結(jié)保藏法。加入10%蜂蜜作保護劑,凍結(jié)溫度-28℃,可保藏5年。</p><p> 4.2 擴大培養(yǎng)[11]:</p>
70、<p> 4.2.1酒母的制備:</p><p> 4.2.2醋酸菌擴大培養(yǎng):</p><p><b> ?、?一級種子</b></p><p> 醋酸菌培養(yǎng)基:酵母膏1%、葡萄糖1%、CaCO3、酒精2。(v/v),pH5.5</p><p> 先將葡萄糖、酵母膏和CaCO3溶在水中,每只1000 m
71、l三角瓶分裝150ml,在100kPa表壓下滅菌30min,冷至室溫,按無菌操作法加入酒精。每一支斜面菌種接一支三角瓶,在32~34℃往復搖床上培養(yǎng)24h。鏡檢菌體生長正常,無雜菌污染可繼續(xù)擴大培養(yǎng)。</p><p><b> ②.二級種子</b></p><p> 每只1000ml三角瓶裝入前述同樣的培養(yǎng)基250ml,接種一級種子10%,于同樣條件下培養(yǎng)16h。
72、鏡檢正常接入種子罐。</p><p><b> ③.三級種子</b></p><p> 將糖化好的糖液泵入50L種子罐內(nèi),定容至35L,升溫至100℃,維持10min滅菌,然后開冷水降溫至32℃,接種酵母培養(yǎng)物10%,于30℃靜置培養(yǎng)30h,酒精度達到4~6°即可。接入二級種子10%。</p><p> 開動攪拌,通氣0.3vv
73、m,維持32~34℃,罐壓30kPa,培養(yǎng)12~14h,要求酸度在20g/l左右,否則應延長或縮短時間。鏡檢正常即可繼續(xù)培養(yǎng)。</p><p><b> ?、?四級種子</b></p><p> 用500L罐裝液350L,接入一罐(即35L)三級種子,改用通氣量0.25vvm,其余條件同上。質(zhì)量指標也與三級種子相同。質(zhì)量合格可用于接種生產(chǎn)罐。</p>
74、<p> 5 培養(yǎng)基的組成及制備</p><p> 5.1酒精發(fā)酵培養(yǎng)基組成:主要原料有高粱玉米粉(麩皮、米糠、紅薯干等粗糧均可)15%,麩皮7%,谷殼(小米殼也可)30%,食鹽10%,淀粉酶、糖化酶各0.04%,,水20%。</p><p> 5.2醋酸發(fā)酵培養(yǎng)基:酒精發(fā)酵后得到的酒液</p><p><b> 5.3發(fā)酵罐滅菌:<
75、;/b></p><p> 空罐滅菌(空消)即發(fā)酵罐罐體的滅菌??障麜r一般維持罐壓0.15~0.2Mpa,罐溫125~130℃,保持30~45min;要求總蒸汽壓力不低于0.3~0.35Mpa,使用汽壓不低于0.25~0.3MPa。</p><p> 在培養(yǎng)基滅菌之前,通常應先將與罐相連的分空氣過濾器用蒸汽滅菌并用空氣吹干。實罐滅菌時,先將輸料管路內(nèi)的污水放掉沖凈,然后將配制好的
76、培養(yǎng)基泵送至發(fā)酵罐(種子罐或料罐)內(nèi),同時開動攪拌器進行滅菌。滅菌前先將各排氣閥打開,將蒸汽引入夾套或蛇管進行預熱,待罐溫升至80~90℃,將排氣閥逐漸關小。接著將蒸汽從進氣口、排料口、取樣口直接通入罐中(如有沖視罐也同時進汽),使罐溫上升到118~120℃,罐壓維持在0.09~0.1Mpa(表壓),并保持30min左右。各路進氣要暢通,防止短路逆流,罐內(nèi)液體翻動要激烈;各路排汽也要暢通,但排汽量不宜過大,以節(jié)約用氣量。在保溫階段,凡進
77、口在培養(yǎng)基液面以下的各管道及沖視鏡管都應進汽;凡開口在液面之上者均應排汽。無論與罐連通的管路如何配制,在實消時均應遵循“不進則出”的原則。這樣才能保證滅菌徹底,不留死角。保溫結(jié)束后,依次關閉各排汽、進汽閥門,待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后,向罐內(nèi)通入無菌空氣,在夾套或蛇管中通冷卻水降溫,使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度,進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。在引入無菌空氣前,應注意罐壓必須低于過濾器壓力,否則物料將倒流入過濾器內(nèi),后果嚴重!滅菌時,總</
78、p><p> 5.4滅菌流程: 配料后由料液罐1放出,可加入為0.01%消泡劑,用連消泵2送入氣液混合器或連消塔3底端,料液被直接蒸汽立即加熱到滅菌溫度383-403K,由頂部流出。料液進入維持罐4,維持8-25min,由維持罐上部側(cè)面流出,維持罐內(nèi)最后的培養(yǎng)液由底部排盡,經(jīng)噴淋冷卻器5冷卻到發(fā)酵溫度,送去發(fā)酵罐。 如下圖所示: </
79、p><p> 6無菌空氣制備系統(tǒng)[12]</p><p> 6.1發(fā)酵生產(chǎn)中制備無菌空氣的大致過程如下:</p><p> 空氣→高空取氣管→除塵器 →空氣壓縮機→貯氣罐→一級冷卻器 →油水分離器→二級冷卻器→除霧氣→加熱器→總過濾器→分過濾器 →無菌空氣</p><p> 無菌空氣制備流程圖 </p&
80、gt;<p> 6.2特點:兩級分離、兩次冷卻、一次加熱的空氣除菌流程是一個比較完善的空氣除菌流程,它,能充分的分離空氣中含有的水分,使空氣在低的相對濕度下進入過濾器,提高過濾效率。</p><p><b> 6.3設備選擇:</b></p><p> ?、? 經(jīng)第一次冷卻后,大部分的水、油都已結(jié)成較大的霧粒,且霧粒濃度比較大,故適宜用旋風分離器分離
81、。</p><p> ?、? 第二冷卻器使空氣進一步冷卻后析出一部分較小的霧粒,宜采用絲網(wǎng)分離器分離,發(fā)揮絲網(wǎng)能夠分離較小直徑的霧粒和分離效果高的作用。</p><p> ?、? 經(jīng)二次分離的空氣帶的霧沫就較少,兩級冷卻可以減少油膜污染對傳熱的影響。</p><p> ?、? 若采用低溫的地下水,可采用串聯(lián)來減少冷卻水用量。在沒有低溫地下水時,第二級可采用冰水冷卻,
82、通常第一級冷卻到30~35℃,第二級冷都到20~25℃。除水后,空氣的相對濕度還是l00%,可用加熱的辦法把空氣的相對濕度降到50~60%。</p><p><b> 7部分工藝計算</b></p><p> 7.1說明:此部分是在假定年產(chǎn)量為500或1000噸產(chǎn)品條件下,計算發(fā)酵罐、種子罐臺數(shù)、公稱體積等,部分參數(shù)根據(jù)資料進行假定</p><
83、p> 發(fā)酵過程物料計算和發(fā)酵罐容積的確定</p><p> 7.2由年產(chǎn)量決定每天放罐發(fā)酵液體積</p><p> ?、侔l(fā)酵工段,每天所需要的放罐發(fā)酵液體積Vd可按下式計算:</p><p> 式中 M——所設計的年產(chǎn)量,t/a; Uq——成品的純度,mg/mg;</p><p> m——年工作日,d/a; η
84、——提煉總收率,%</p><p> 在本工藝中年產(chǎn)量M為1000t/a,成品的純度Uq為0.8mg/mg,年工作日為250d/a,酶活力Uf為250t/m3,提煉總收率η為40%</p><p> Vd[酒精]=1000*1000*0.8/(250*250*100%)=12.8 m3/d</p><p> Vd[醋酸] =1000*1000*0.7/(250
85、*250*40%)=28 m3/d</p><p> ?、诎l(fā)酵罐公稱容積V0可按下式計算:</p><p> 式中 Vd——每天所需發(fā)酵液體積,m3/d; nd——每天放罐罐數(shù),1/d; ΦL—發(fā)酵罐裝料系數(shù)</p><p> 每天放罐罐數(shù)nd為4/d,發(fā)酵罐裝料系數(shù)ΦL為40%,已計算得Vd為32m3/d,則發(fā) 酵罐公稱容積</p><
86、;p> V0[酒精]=12.8/(4*100%)=3.2m3 </p><p> V0[醋酸]=28/(4*40%)=17.5m3</p><p> ?、鄯N子罐公稱容積和臺數(shù)的確定 :</p><p> 本工藝中酒精發(fā)酵罐為8臺,種子罐周期為0.5天,發(fā)酵罐周期為3天,則</p><p> 本工藝中酒醋酸發(fā)酵罐為8臺,種
87、子罐周期為2天,發(fā)酵罐周期為5天,則</p><p> 酒精種子罐臺數(shù)為:8*0.5/3=1.3臺 即2臺</p><p> 醋酸種子罐臺數(shù)為:8*2/5=3.2臺 即4臺</p><p> 種子罐的公稱容積應根據(jù)接種比,培養(yǎng)過程中液體損失率和種子罐的裝料系數(shù)來計算</p><p> 本工藝中發(fā)酵罐計量體積為150m3,接種比
88、為0.07,液體損失率為15%,種子罐裝料系數(shù)為65%, </p><p> 則種子罐公稱容積=150*(0.07)*(1+15%)/65%=18.6m3</p><p> ?、茉O備的公稱容積V0,一般是指圓筒部分容積Vc加上底封頭的容積Vb:</p><p> 式中 D——容器內(nèi)徑,m; H——容器的筒身高度,m</p><
89、;p> 底封頭容積Vb可近似按下式計算:</p><p> 若筒身高徑比H/D=a,則:</p><p> 容器內(nèi)徑D為2m,筒身高徑比H/D=a為6,則設備的公稱容積:</p><p> V0=(0.785*6+0.15)*23=38.9m3</p><p> 8 三廢處理[13]</p><p>
90、 工業(yè)發(fā)酵過程中,經(jīng)常排放大量廢水、廢氣和廢渣,對環(huán)境造成污染和危害,因而開展工業(yè)“三廢”處理和綜合利用也是發(fā)酵生產(chǎn)中不可忽視的一環(huán)。</p><p><b> 8.1廢氣:</b></p><p> 對于排入大氣的污染物,應控制其排放濃度及排放總量,使其不超過所在地區(qū)污染物的允許濃度和環(huán)境容量,主要的處理方法有以下幾種:</p><p>
91、 ?、倮梅缐m裝置去除排放廢氣中的煙塵及各種粉塵,如原料風選過程中的洗塵塔、袋濾器、離心或除塵器等;②采取氣體吸收法處理有害氣體,如用氨水、氫氧化鈉吸收廢氣中的二氧化碳、二氧化硫等;</p><p> ?、蹜美淠?、催化轉(zhuǎn)化、活性炭吸附等物理、化學和物理化學方法處理排放廢氣中的主要污染物,酒精生產(chǎn)過程中蒸餾工段的各級冷凝器。</p><p> ?、艽姿岚l(fā)酵中酒精發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳可以經(jīng)壓縮
92、制液態(tài)二氧化碳和干冰</p><p><b> 8.2廢水:</b></p><p> 發(fā)酵工業(yè)產(chǎn)生的廢水量大、成分復雜,排放之前必須進行處理。主要的處理方法有以下幾種:</p><p> .節(jié)約用水,提高水的循環(huán)利用率,杜絕跑、冒、滴、漏,提高原料利用率和化工材料的回收率;</p><p> ⑵.改進生產(chǎn)工藝,
93、盡量減少生產(chǎn)過程中廢液的排放量;</p><p> ⑶.對所產(chǎn)生的廢水,要設計廢水處理站進行處理。一級處理:以物理方法為主,目的是除去廢水中懸浮狀態(tài)的固形物質(zhì),并調(diào)pH值;二級處理:是生化處理,目的是大幅度去除廢水中呈膠體和分解狀態(tài)的有機物污染物質(zhì);三級處理:需要采取物理化學法,目的是進一步去除二級處理所未能除去的污染物質(zhì),以達到生活飲用水標準。</p><p> ⑷.醋酸提取后產(chǎn)生的
94、廢水可以凈化后循環(huán)使用。</p><p><b> 8.3廢渣:</b></p><p> 廢渣處理首先要減少廢渣的產(chǎn)生,其次對廢渣盡量回收利用,從廢渣中提取有用的物質(zhì),利用廢渣制造副產(chǎn)品。變廢為寶,最后對回收利用后剩余的殘渣進行最終處理(如作為肥料,填埋等),謀求通過自然凈化作用使它們迅速回歸自然。廢渣綜合利用的主要途徑如下:</p><p&
95、gt; ?、馘仩t煤渣,可用來制煤渣磚或配制水泥; </p><p> ②培養(yǎng)基渣、發(fā)酵液渣等廢渣,可直接作為飼料出售或進一步加工成家畜的精飼料,也可利用廢菌體等進行沼氣發(fā)酵,或從這些廢渣中提取有用的物質(zhì)。</p><p><b> 參考文獻</b></p><p> [1]蔣美芬. 醋酸生產(chǎn)、市場分析及需求預測.《上海化工》2006.9:
96、31-32</p><p> [2]趙德. 醋的性能、源流、工藝和品質(zhì). 《江蘇調(diào)味副食品》2004 年第21 卷第1 期(總第84 期) :1-4</p><p> [3]趙良啟,李麗. 我國食醋生產(chǎn)技術的歷史、現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(上)《中國調(diào)味品》第1 期2005 年1 月:3-6</p><p> [4]趙良啟,李麗. 我國食醋生產(chǎn)技術的歷史、現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢
97、(下)《中國調(diào)味品》第2期2005年2月:15-17</p><p> [5] 金其榮,張繼民,徐勤《有機酸發(fā)酵工藝學》1989.6:415-418</p><p> [6]金其榮,張繼民,徐勤.《有機酸發(fā)酵工藝學》1989.6:418-419,455</p><p> [7]金其榮,張繼民,徐勤.《有機酸發(fā)酵工藝學》1989.6:423-455</p&
98、gt;<p> [8]http://bbs.hcbbs.com/viewthread.php?tid=176395</p><p> [9]祖國仁,劉陽.優(yōu)勢酵母菌的分離篩選?!洞筮B輕工業(yè)學院學報》第17 卷第1 期1998年3月:24-25</p><p> [10]施安輝,劉吉慶.高產(chǎn)醋酸菌株的誘變選育及其醋酸發(fā)酵規(guī)律的研究(山東大學微生物學系)實驗報告:16-18
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